左旋咪唑的危害及檢測目的

左旋咪唑作為一種廣譜型抗線蟲藥，藥源豐富，被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖企業(yè),，效果良好,。但不合理地使用左旋咪唑會造成動物產(chǎn)品中殘留,，研究表明，人體攝入過量左旋咪唑可引起畸變,、癌變等癥狀,，嚴(yán)重危害人類健康。為此我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和國家市場監(jiān)督管理總局2019年發(fā)布的GB 31650-2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中獸藥最/大殘留*》中明確規(guī)定了左旋咪唑在動物靶組織中的殘留*,，并且規(guī)定泌乳期和產(chǎn)蛋期禁用。

本文闡述了如何將左旋咪唑從樣品基質(zhì)中分離提取出來,，并經(jīng)過凈化后，轉(zhuǎn)化成高效液相色譜儀可以檢測的形式,。以提取,、凈化為重點,，依據(jù)國標(biāo)GB 29681-2013，為檢測人員和相關(guān)領(lǐng)域研究人員提供一定的參考,。

檢測項目：左旋咪唑

應(yīng)用范圍：牛奶

高效液相色譜法

方法原理：試料中殘留的左旋咪唑，用碳酸鹽緩沖液和乙酸乙酯溶液提取,，C₁₈柱凈化，甲醇洗脫,，高效液相色譜測定,，外標(biāo)法定量,。

前處理儀器：

分析天平（感量0.00001 g和0.01 g）,；均質(zhì)機；冷凍高速離心機,；電熱恒溫水浴鍋,；旋渦混合器；茄形瓶（50 mL）,；離心管；濾膜（0.45 μm）,。

檢測儀器： HPLC-PDA 

試樣的制備與保存

取適量新鮮或冷藏的空白或供試牛奶，混合均質(zhì),。

取均質(zhì)后的供試樣品,，作為供試試料,；

取均質(zhì)后的空白樣品,，作為空白試料；

取均質(zhì)后的空白樣品,，添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，作為空白添加試料,。

試料于零下20 ℃以下保存,。

前處理方法

1.提取

稱取試料5 g± 0.05 g,，于離心管中，加碳酸鹽緩沖液5 mL,，加乙酸乙酯10 mL,，混勻,，6000 r/min離心10 min，取上清液于茄形瓶中,，再加乙酸乙酯10 mL萃取一次,，合并兩次上清液，于50 ℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,，加碳酸鹽緩沖液5 mL溶解殘余物，備用,。

2.凈化

C₁₈柱（3 mL/500 mg）依次用水3 mL,、甲醇3 mL和碳酸鹽緩沖液3 mL活化，取備用液過柱,，用水3 mL淋洗,，用甲醇5 mL洗脫，收集洗脫液,，于50 ℃水浴氮氣吹干,，用流動相1.0 mL溶解殘余物,，濾膜過濾，供高效液相色譜測定,。

國標(biāo)解讀及注意事項

1.左旋咪唑用甲醇配成1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液,，在2 ℃～4 ℃保存，可使用3個月,。

2.本方法使用碳酸鹽緩沖液提取，乙酸乙酯萃取,，C₁₈固相萃取柱凈化的方式進行目標(biāo)化合物的提取凈化。

3.本方法采用兩次萃取的方式,，提高目標(biāo)化合物的回收率。

4.為保證固相萃取凈化效果,，過柱時需要控制流速,，使溶液一滴一滴地流下,。水淋洗后*抽干小柱,，再進行洗脫,。

5.左旋咪唑也可以使用液質(zhì)聯(lián)用儀進行檢測，同時添加相對應(yīng)的鹽酸鹽同位素內(nèi)標(biāo),，進行回收率的校正,。

參考文獻(xiàn)

GB 29681-2013 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 牛奶中左旋咪唑殘留量的測定 高效液相色譜法