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分光光度計(jì)使用中的那些事!

來源:中科瑞捷(天津)科技有限公司   2021年04月20日 11:49  
  分光光度計(jì)是用不連續(xù)的波長采樣反射物體或透射物體的一種測量儀器,。由于不同物體分子的結(jié)構(gòu)不同,,對(duì)不同波長光線的吸收能力也不同,因此,,每種物體都具有特定的吸收光譜,。能從含有各種波長的混合光中,將每一種單色光分離出來,,并測量其強(qiáng)度的儀器叫做分光光度計(jì),。
 
  分光光度法是比色法的發(fā)展。比色法只限于在可見光區(qū),,分光光度法則可以擴(kuò)展到紫外光區(qū)和紅外光區(qū),。分光光度法則要求近于真正單色光,其光譜帶寬最大不超過3-5nm,,在紫外區(qū)可到1nm以下,,來自棱鏡或光柵,具有較高的精度,。
 
  分光光度計(jì),?就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。分光光度計(jì)可分為紫外分光光度計(jì),、可見光分光光度計(jì)(或比色計(jì)),、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。
 
  分光光度計(jì)左右滑動(dòng)查看更多
 
  項(xiàng)目對(duì)分析結(jié)果的影響
 
  1,、波長準(zhǔn)確度
 
  分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對(duì)應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長,。由于儀器的制造和調(diào)整誤差,,單色光的實(shí)際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,,對(duì)波長準(zhǔn)確度要求允許寬些,。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,,此時(shí)波長準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。
 
  2,、透射比(吸光度)準(zhǔn)確度
 
  很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,。
 
  3、雜散光
 
  雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的,。雜散光是分析樣品的非吸收光,,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,,將給分析結(jié)果帶來一定的誤差,。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視,。因此,,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。
 
  使用與維護(hù)
 
  1,、若大幅度改變測試波長,,需稍等片刻,等燈熱平衡后,,重新校正“0”和“100%”點(diǎn),。然后再測量。
 
  2,、指針式儀器在未接通電源時(shí),,電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零,。
 
  3、比色皿使用完畢后,,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,,影響比色皿的透光率,。
 
  4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈,,以免影響光效率,。
 
  5,、WFZ800-DA、756型等分光光度計(jì),,由于其光電接收裝置為光電倍增管,,它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號(hào),,而不能用來檢測強(qiáng)光,。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移,靈敏度下降,。針對(duì)其上述特點(diǎn),,在維修、使用此類儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長時(shí)間暴露于光下,,因此在預(yù)熱時(shí),,應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn),。
 
  6,、放大器靈敏度換擋后,必須重新調(diào)零,。
 
  7,、比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,,否則將使測試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應(yīng)進(jìn)行比較,。
 
  具體方法如下:分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,,把儀器置于某一波長處,石英比色杯,;220nm,、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,,將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%,,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,,如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用,,若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測試結(jié)果的影響。
 
  典型故障及其排除方法
 
  1,、儀器不能調(diào)零,。可能原因:
 
  a.光門不能*關(guān)閉,。解決方法:修復(fù)光門部件,,使其*關(guān)閉,。
 
  b.透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕,。
 
  c.儀器嚴(yán)重受潮,。解決方法:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會(huì)兒使其干燥,,并更換干燥劑,。
 
  d.電路故障。解決方法:檢修電路,。
 
  2,、儀器不能調(diào)“100%”??赡茉颍?br /> 
  a.光能量不夠,。解決方法:增加靈敏度倍率檔位,或更換光源燈(盡管燈還亮),。
 
  b.比色皿架未落位,。解決方法:調(diào)整比色皿架使其落位。
 
  c.光電轉(zhuǎn)換部分老化,。解決方法:更換部件,。
 
  d.電路故障。解決方法:調(diào)修電路,。
 
  3,、測量過程中,“100%”點(diǎn)經(jīng)常變動(dòng)??赡茉颍?br /> 
  a.比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,,或其表面有液滴。解決方法:用擦鏡紙擦干凈比色皿表面,,然后將其安放在比色槽的左邊,,上面用定位夾定位。
 
  b.電路故障(電壓,、光電接收,、放大電路)。解決方法:送修,。
 
  4,、數(shù)顯不穩(wěn)??赡茉颍?br /> 
  a.預(yù)熱時(shí)間不夠,。解決方法:延長預(yù)熱時(shí)間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因,長時(shí)間處于工作狀態(tài)時(shí),,也會(huì)工作不穩(wěn)),。
 
  b.光電管內(nèi)的干燥劑失效,,使微電流放大器受潮。解決方法:烘烤電路,,并更換或烘烤干燥劑,。
 
  c.環(huán)境振動(dòng)過大、光源附近空氣流速大,、外界強(qiáng)光照射等,。解決方法:改善工作環(huán)境。
 
  d.光電管,、電路等其它原因,。
 
  小結(jié)
 
  綜上所述,以下幾個(gè)問題應(yīng)引起儀器操作人員注意:
 
  1,、比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題,。
 
  有些使用者對(duì)這個(gè)問題不夠重視,因操作不當(dāng)造成偶然誤差,,嚴(yán)重影響分析結(jié)果,。
 
  首先,應(yīng)保證比色皿不傾斜放置,。稍許傾斜,,就會(huì)使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致,還可能使入射光不能全部通過樣品池,,導(dǎo)致測試比準(zhǔn)確度不符合要求,。
 
  其次,應(yīng)保證每次測試時(shí),,比色皿架推拉到位,。若不到位,將影響到測試值的重復(fù)性或準(zhǔn)確度,。最后,還應(yīng)保證比色皿的清潔度,延長其使用壽命。
 
  2,、干燥劑的使用問題,。干燥劑失效將導(dǎo)致:
 
  a.數(shù)顯不穩(wěn)、無法調(diào)“0”點(diǎn)或“100%”點(diǎn)(電路或光電管受潮),。
 
  b.反射鏡發(fā)霉或沾污,,影響光效率、雜散光增加,。鑒于上述原因,,分光光度計(jì)的放置地點(diǎn)應(yīng)遠(yuǎn)離水池等濕度大的地方、干燥劑應(yīng)定期更換或烘烤,。
 
  3,、儀器的工作環(huán)境
 
  應(yīng)避免陽光直射,、避免強(qiáng)電場、避免與較大功率的電器設(shè)備共電,、避開腐蝕性氣體等,。

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