您是怎樣對96孔板進行鋪板的?當(dāng)細(xì)胞用96孔板接種時，細(xì)胞經(jīng)常是不均勻分布,。第二天就會發(fā)現(xiàn)有些地方出現(xiàn)堆積性生長,，而還有不少地方細(xì)胞則很稀疏，細(xì)胞密集的地方因細(xì)胞與細(xì)胞之間的接觸抑制影響細(xì)胞的生長,，這樣就很難評價干預(yù)因素對細(xì)胞的作用,。因此，將96孔板種均勻也是進行后續(xù)實驗的前提,，現(xiàn)將以前用的老辦法和最后用的新方法比較一下,，以讓大家看看各自優(yōu)缺。

　　1,、老方法：植板后，用手拿起96孔板,，左右搖動,，然后來回?fù)u動幾次，但這種方法通常在2-3個細(xì)胞的5口井中分布不均勻,。 在大多數(shù)情況下,，中間的孔會出現(xiàn)成堆的分布，會讓人感到一陣麻煩,。 再一次,，看到一位老師將電路板放在振動器上并搖動幾分鐘。 結(jié)果更糟,。 細(xì)胞都在中間,。

　　通常，會在96孔板的每個孔上,，加入100微升的細(xì)胞懸浮液,。把它從左邊加到洞底。加入一半板材后,，與未加入的細(xì)胞懸浮液混合,，然后繼續(xù)加入剩余的一半板材。蓋上蓋子后，用左手輕輕握住木板的左邊,，然后用右手輕拍木板的右邊緣,。注意力集中在力量上(通常敲擊它三次)。太多或太多次會導(dǎo)致細(xì)胞堆積,。順時針轉(zhuǎn)動盤子(逆時針方向不好) ,，將剩下的三面逐一拍打，靜置5分鐘左右,，然后放入37度的培養(yǎng)箱中,。

　　2、新方法：這種方法是非常好,，非常均勻播種,。使用等速吸引吸取細(xì)胞，然后吸移嘴對孔(注意尖不接觸孔槍頭底部)的側(cè)壁上,，然后再慢慢敲除細(xì)胞吸管定植后,，不要搖晃板，它只是可以直接在顯微鏡下被放置,，這個方法可以被說成是有效的,。

　　補充：從6孔板到96孔板，細(xì)胞應(yīng)均勻分布分散,。用培養(yǎng)基進行稀釋細(xì)胞,，然后將培養(yǎng)板放置在適當(dāng)?shù)奈恢谩Ｌ砑右粋€細(xì)胞時和之后,，請勿移動能力培養(yǎng)板,；如果在空氣中沒有介質(zhì)吹入，但是不要移動培養(yǎng)板,，加入細(xì)胞后,，靜置20-30分鐘，然后可以將其移入培養(yǎng)箱,。這樣,，細(xì)胞結(jié)構(gòu)通常具有均勻生長。當(dāng)然,，前提是細(xì)胞消化系統(tǒng)良好,。