消毒和滅菌兩個(gè)詞在實(shí)際使用中常被混用,其實(shí)它們的含義是有所不同的,。消毒是指應(yīng)用消毒劑等方法殺滅物體表面和內(nèi)部的病原菌營(yíng)養(yǎng)體的方法,而滅菌是指用物理和化學(xué)方法殺死物體表面和內(nèi)部的所有微生物,,使之呈無(wú)菌狀態(tài)。
物理方法
1.溫度:
利用溫度進(jìn)行滅菌、消毒或防腐,是常用而又方便有效的方法,。高溫可使微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和酶類(lèi)發(fā)生變性而失活,從而起滅菌作用,,低溫通常起抑菌作用。
1)干熱滅菌法:
a.灼燒滅菌法:
利用火焰直接把微生物燒死,。此法*可靠,,滅菌迅速,但易焚毀物品,,所以使用范圍有限,,只適合于接種針、環(huán),、試管口及不能用的污染物品或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物的尸體等的滅菌,。
b.干熱空氣滅菌法:
這是實(shí)驗(yàn)室中常用的一種方法,即把待滅菌的物品均勻地放入烘箱中,,升溫至160℃,,恒溫1小時(shí)即可。此法適用于玻璃皿,、金屬用具等的滅菌,。
2)濕熱滅菌法:
在同樣的溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好,,這是因?yàn)橐环矫婕?xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)含水量高,,容易變性,。另一方面高溫水蒸汽對(duì)蛋白質(zhì)有高度的穿透力,從而,,加速蛋白質(zhì)變性而迅速死亡,。
a.巴氏消毒法:
有些食物會(huì)因高溫破壞營(yíng)養(yǎng)成分或影響質(zhì)量,如,,牛奶,、醬油、啤酒等,,所以只能用較低的溫度來(lái)殺死其中的病原微生物,,這樣既保持食物的營(yíng)養(yǎng)和風(fēng)味,又進(jìn)行了消毒,,保證了食品衛(wèi)生,。該法一般在62℃,30分鐘即可達(dá)到消毒目的,。此法為法國(guó)微生物學(xué)家巴斯德*,,故名為巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法:
直接將要消毒的物品放入清水中,,煮沸15分鐘,,即可殺死細(xì)菌的全部營(yíng)養(yǎng)和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉或2%的石炭酸,,則效果更好,。此法適用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒,。
c.間歇滅菌法:
上述兩種方法在常壓下,,只能起到消毒作用,而很難做到*無(wú)菌,。若采用間歇滅菌的方法,,就能殺滅物品中所有的微生物。具體做法是:將待滅菌的物品加熱至100℃,,15~30分鐘,,殺死其中的營(yíng)養(yǎng)體。然后冷卻,,放入37℃恒溫箱中過(guò)夜,,讓殘留的芽孢萌發(fā)成營(yíng)養(yǎng)體。第2天再重復(fù)上述步驟,,三次左右,,就可達(dá)到滅菌的目的。此法不需加壓滅菌鍋,適于推廣,,但操作麻煩,,所需時(shí)間長(zhǎng)。
d.加壓蒸汽滅菌法:
這是發(fā)酵工業(yè),、醫(yī)療保健,、食品檢測(cè)和微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常用的一種滅菌方法。它適用于各種耐熱,、體積大的培養(yǎng)基的滅菌,,也適用于玻璃器皿、工作服等物品的滅菌,。
加壓蒸汽滅菌是把待滅菌的物品放在一個(gè)可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進(jìn)行的,,以大量蒸汽使其中壓力升高。由于蒸汽壓的上升,,水的沸點(diǎn)也隨之提高,。在蒸汽壓達(dá)到1.055公斤/厘米2時(shí),加壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的溫度可達(dá)到121℃,。在這種情況下,,微生物(包括:芽孢)在15~20分鐘便會(huì)被殺死,而達(dá)到滅菌目的,,如,,滅菌的對(duì)象是砂土、石蠟油等面積大,、含菌多,、傳熱差的物品,則應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)滅菌時(shí)間,。
在加壓蒸汽滅菌中,,要引起注意的一個(gè)問(wèn)題是,在恒壓之前,,一定要排盡滅菌鍋中的冷空氣,否則表上的蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對(duì)應(yīng)關(guān)系,,這樣會(huì)大大降低滅菌效果,。
3)影響滅菌的因素:
a.不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對(duì)高溫的敏感性不同。多數(shù)微生物的營(yíng)養(yǎng)體和病毒在50~65℃,,10分鐘就會(huì)被殺死;但各種孢子,、特別是芽孢能抗熱,其中抗熱性的是嗜熱脂肪芽孢桿菌,,要在121℃,,12分鐘才被殺死。對(duì)同種微生物來(lái)講,幼齡菌比老齡菌對(duì)熱更敏感,。
b.微生物的數(shù)量多少顯然會(huì)影響滅菌的效果,,數(shù)量越多,熱死時(shí)間越長(zhǎng),。
c.培養(yǎng)基的成分與組成也會(huì)影響滅菌效果,。一般地講,蛋白質(zhì),、糖或脂肪存在,,則提高抗熱性,pH在7附近,,抗熱性,,偏向兩極,則抗熱能力下降,,而不同的鹽類(lèi)可能對(duì)滅菌產(chǎn)生不同的影響;固體培養(yǎng)基要比液體培養(yǎng)基滅菌時(shí)間長(zhǎng),。
4)滅菌對(duì)培養(yǎng)基成分的影響:
a.pH值普遍下降。
b.產(chǎn)生混濁或沉淀,,這主要是由于一些離子發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生混濁或沉淀,。
例如:Ca2+與PO4-3化合,就會(huì)產(chǎn)生磷酸鈣沉淀,。
c.不少培養(yǎng)基顏色加深,。
d.體積和濃度有所變化。
e.營(yíng)養(yǎng)成分有時(shí)受到破壞,。
2.輻射
利用輻射進(jìn)行滅菌消毒,,可以避免高溫滅菌或化學(xué)藥劑消毒的缺點(diǎn),所以應(yīng)用越來(lái)越廣,,目前主要應(yīng)用在以下幾個(gè)方面:
1)接種室,、手術(shù)室、食品,、藥物包裝室常應(yīng)用紫外線(xiàn)殺菌,。
2)應(yīng)用β射線(xiàn)作食品表面殺菌,γ射線(xiàn)用于食品內(nèi)部殺菌,。經(jīng)輻射后的食品,,因大量微生物被殺滅,再用冷凍保藏,,可使保存期延長(zhǎng),。
3.過(guò)濾
采用機(jī)械方法,設(shè)計(jì)一種濾孔比細(xì)菌還小的篩子,,做成各種過(guò)濾器,。通過(guò)過(guò)濾,只讓液體培養(yǎng)基從篩子中流下,而把各種微生物菌體留在篩子上面,,從而達(dá)到除菌的目的,。這種滅菌方法適用于一些對(duì)熱不穩(wěn)定的體積小的液體培養(yǎng)基的滅菌以及氣體的滅菌。它的you點(diǎn)是不破壞培養(yǎng)基中各種物質(zhì)的化學(xué)成分,。但是比細(xì)菌還小的病毒仍然能留在液體培養(yǎng)基內(nèi),,有時(shí)會(huì)給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)一定的麻煩。
化學(xué)方法
一般化學(xué)藥劑無(wú)法殺死所有的微生物,,而只能殺死其中的病原微生物,,所以,是起消毒劑的作用,,而不是滅菌劑,。
能迅速殺滅病原微生物的藥物,稱(chēng)為消毒劑,。能抑制或阻止微生物生長(zhǎng)繁殖的藥物,,稱(chēng)為防腐劑。但是一種化學(xué)藥物是殺菌還是抑菌,,常不易嚴(yán)格區(qū)分,。消毒劑在低濃度時(shí)也能殺菌(如,1:1000硫柳汞),。由于消毒防腐劑沒(méi)有選擇性,,因此,對(duì)一切活細(xì)胞都有毒性,,不僅能殺死或抑制病原微生物,,而且對(duì)人體組織細(xì)胞也有損傷作用,所以,,只能用于體表,、器械、排泄物和周?chē)h(huán)境的消毒,。常用的化學(xué)消毒劑有:石碳酸,、來(lái)蘇水、lv化汞,、dian酒,、酒精等。
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