二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度（37°C）、穩(wěn)定的CO2水平（5%）,、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）,、較高的相對濕度（95%），來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置,。 廣泛應用于細胞,、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)，常見于細胞動力學研究,、哺乳動物細胞分泌物的收集,、各種物理、化學因素的致癌或毒理效應,、抗原的研究和生產,、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產抗體、體外授精（IVF）,、干細胞,、組織工程、藥物篩選等研究領域,。 
 在生物活體內,，生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護細胞或組織，但是在體外培養(yǎng)時,，沒有任何保護自己的免疫屏障,。對于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數溫度、CO2 和濕度,，大多數培養(yǎng)箱都能滿足研究實驗的需要,。然而，針對培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源,，各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,，因此細胞體外培養(yǎng)中*的威脅實際上是污染問題。 
 二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：細菌,、真菌（霉菌和酵母菌）,、病毒,、支原體、非同種細胞,。 
      對于細胞來說,，理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存，培養(yǎng)箱本身是不會辨別的,，而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內,，因此箱體內能否抑菌或滅菌關鍵！ 
      細菌：細菌污染后,，培養(yǎng)基1-2天就會變色,，對細胞生長影響明顯，應迅速將污染細胞與其它細胞系隔離,，滅菌后丟棄,，還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺。 
      病毒：由于病毒寄生生存,，爆發(fā)后盡快和正常細胞隔離,，丟棄處理，相對來說容易處理,，對操作者威脅較大,；盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但生產疫苗是不安全的,。因此,，潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題,。
真菌（霉菌和酵母菌）：真菌生長的比較慢,，不象細菌那么容易被發(fā)現，但是一旦發(fā)現有它的存在細胞就被污染了,；目前沒有好的抑制方法,，包括現在常用的兩性霉素，一旦污染容易反復爆發(fā),，尤其孢子很難殺滅,。 
支原體：支原體污染后，因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,，細胞無明顯變化，外觀上給人以正常感覺,，實則細胞已經受到多方面潛在影響,，如引起細胞變形，影響DNA合成,，抑制細胞生長等,，往往被大多數實驗者忽視,。 
非同種細胞：即細胞交叉污染，由于細胞培養(yǎng)操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,，往往會使一種細胞被另一種細胞污染,。目前，世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,，致使許多實驗宣告無效,。
因此，以上污染一旦發(fā)生,，細胞*后基本只能丟棄,，實驗無法挽救，對于許多取樣困難的實驗損失無法估量,！ 
 目前，二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術主要有干熱,、濕熱,、紫外燈照射、消毒劑擦拭等,。 
 高溫干熱空氣滅菌是目前*的*有效的滅菌技術,，能消滅所有微生物污染源（包括耐高溫的芽孢桿菌）；濕熱滅菌通常用于高壓蒸汽滅菌中,，比較少用在CO2培養(yǎng)箱上,，濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法，煮沸的水溫一般至少需為100℃,，細菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死,，但芽胞常需煮沸2小時以上才可被殺死；紫外燈照射法的有效性受很多因素影響,，如遮擋,、時間、強度,、照射距離,，濕度等，滅菌效果很難保證,；消毒劑擦拭法是對表面滅菌的方法,，適合于平整的表面如實驗臺面，而箱體內部設計的死角,、各種器件因無法擦拭等因素導致滅菌效果也很有限,，而且含氯、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕作用,，不能對不銹鋼箱體進行擦拭滅菌,。