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PCR儀的分類

來(lái)源:北京賽百奧科技有限公司   2021年03月19日 12:12  
 簡(jiǎn)單的說(shuō),,PCR就是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù),,可以將一段基因復(fù)制為原來(lái)的一百億至一千億倍,。根據(jù)DNA擴(kuò)增的目的和檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn),,可以將PCR儀分為普通PCR儀,,梯度PCR儀,原位PCR儀,,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀四類,。

分類
普通的PCR儀

把一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀,叫傳統(tǒng)的PCR儀,,也叫普通PCR儀,。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行。主要是做簡(jiǎn)單的,,對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增,。該儀器主要應(yīng)用于科研研究,教學(xué),,醫(yī)學(xué)臨床,,檢驗(yàn)檢疫等機(jī)構(gòu)。

梯度PCR儀

把一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),,通常有12種溫度梯度,,這樣的儀器就叫梯度PCR儀,。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段,其適退火溫度是不同的,,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的適退火溫度,,進(jìn)行有效的擴(kuò)增,。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣節(jié)約成本的同時(shí)也節(jié)約了時(shí)間,。主要用于科研,教學(xué)機(jī)構(gòu),。梯度PCR儀,,在不設(shè)置梯度的情況下也可以做普通PCR擴(kuò)增。具有雙槽梯度的不多,,領(lǐng)成具備此功能,。

原位PCR儀

用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀,如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等,。是保持細(xì)胞或組織的完整性,,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞的靶DNA所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增,,不但可以檢測(cè)到靶DNA,,又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置,于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實(shí)用價(jià)值,。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),,就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,,只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素,、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增,。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出,。把這PCR儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(qPCR儀)。熒光定量PCR儀有單通道,,雙通道,,和多通道。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時(shí)候,,選用單通道,,有多熒光標(biāo)記的時(shí)候用多通道。單通道也可以檢測(cè)多熒光的標(biāo)記的目的基因表達(dá)產(chǎn)物,,因?yàn)橐淮沃荒軝z測(cè)一種目的基因的擴(kuò)增量,,需多次擴(kuò)增才能檢測(cè)完不同的目的基因片段的量。該儀器主要用于醫(yī)學(xué)臨床檢測(cè),生物醫(yī)藥研發(fā),,食品行業(yè),,科研院校等機(jī)構(gòu)。

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