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酶標儀是測什么的

來源:成都領度儀器有限公司   2021年01月27日 09:26  

即酶聯(lián)免疫檢測儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器,??珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣?/font>2大類,但其工作原理基本上都是一致的,,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析,。 測定一般要求測試液的終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求,。

酶標儀實際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同. 圖示是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,,進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收,,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應的電信號.電信號經(jīng)前置放大,,對數(shù)放大,,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算,后由顯示器和打印機顯示結果. 微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構X方向和Y方向的運動來移動微孔板,,從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程.而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測,,因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構和控制電路,從而使儀器更小巧,,結構也更簡單.

微孔板是一種經(jīng)事先包埋于放置待測樣本的透明塑料板,,板上有多排大小均勻一致的小孔,,孔內(nèi)都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.

光是電磁波,,波長100nm~400nm稱為紫外光,,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光,。人們之所以能夠看到色彩,,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光,,但對綠色不吸收,反射出來,,所以植物呈現(xiàn)為綠色,。酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值,。

隨著檢測方式的發(fā)展,,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做多功能酶標儀,可檢測吸光度(Abs),、熒光強度(FI),、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP),、和化學發(fā)光(Lum),。

酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長,,而濾光片型酶標儀則根據(jù)選配的濾光片,,只能截取特定波長進行檢測。

檢測單位

光通過被檢測物,,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系,。

檢測單位用OD值表示,, OD是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度,, OD=log(1/trans),,其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,,OD值與光強度成下述關系:

E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度,, Ιo 為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度,。

OD值由下述公式計算:

c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子

在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,,在此波長下,,此物質(zhì)能夠吸收多的光能量。如果選擇其它的波長段,,就會造成檢測結果的不準確,。因此,在測定檢測物時,,我們選擇特定的波長進行檢測,,稱為測量波長。

但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,,為了消除這種非特異性吸收,,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性,。在參照波長下,,檢測物光的吸收小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收,。

 

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