問題一,、1.在15min內(nèi)*溶出的藥物需要做溶出曲線嗎,？

2.如果參比制劑在0.1mol/l鹽酸中很容易分解,，還需要對酸性介質(zhì)進(jìn)行研究嘛？做溶出介質(zhì)的目的主要是選擇的溶出介質(zhì)還是模擬體內(nèi),，考察樣品的溶解情況,？
3.溶出度研究，做6粒行不行,？

謝老師：

(1)需要,。但僅做5、10,、15和30分鐘即可,，因15分鐘和30分鐘已至平臺區(qū)。
(2)在測定原料藥在各溶出介質(zhì)中的溶解度和穩(wěn)定性時(shí),，如發(fā)現(xiàn)在某一介質(zhì)中不穩(wěn)定,，可依據(jù)不穩(wěn)定性程度（即降解速率），酌情考慮測定辦法,，如：

立即進(jìn)樣,；

使主成分全部轉(zhuǎn)變成該“物質(zhì)”后測定含量，再推導(dǎo)出主成分溶出量（需知兩者的轉(zhuǎn)換系數(shù)）,；

通過HPLC法將兩者分離,，分別測定。將“轉(zhuǎn)變物”換算成主成分,，仍以主成分計(jì)算出溶出量,。

(4)測定溶出曲線有很多作用和目的，不僅是為了建立體內(nèi)外相關(guān)性,，更為重要的是采用這樣一種手段來“剖析”和“肢解”固體制劑內(nèi)在品質(zhì),！

(5)眾多法規(guī)上均要求做12粒，是從統(tǒng)計(jì)學(xué)角度出發(fā),，當(dāng)生產(chǎn)規(guī)模達(dá)幾十萬片,、甚至幾百萬片時(shí)的考慮。而就目前國內(nèi)實(shí)際生產(chǎn)情況,，無論是在研發(fā)階段和質(zhì)量評估階段皆可采用6片,，其測定數(shù)據(jù)已基本被認(rèn)為具有代表性了。 

問題二,、復(fù)方制劑,，其中一個(gè)API為酸性（pKa4.5-6.0），另一個(gè)API的pKa6.5-8.5,，是分別制粒后壓制成片劑,，請問它們應(yīng)該做哪些溶出介質(zhì)呢？

謝老師：
(1)首先分別進(jìn)行兩物質(zhì)在不同溶出介質(zhì)的溶解度測定，觀測pH值-溶解度曲線圖在縱坐標(biāo)4.5~8.0間的情況（是否較為“陡峭”）,。
(2)如平坦,、采用通常的四種介質(zhì)進(jìn)行研究皆可；如陡峭,，建議增加“在4.5~8.0間,，每隔0.5間隔”的多溶出介質(zhì)研究，然后根據(jù)實(shí)際測定情況,，擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的溶出介質(zhì),。

問題三、有個(gè)問題請教,，看到你寫的“溶出曲線的測定與比較”中關(guān)于計(jì)算時(shí)間點(diǎn)的確定,，說調(diào)釋制劑溶出率80%以上的時(shí)間點(diǎn)應(yīng)不多于一個(gè)，調(diào)釋制劑選擇溶出率相近的4-6個(gè)時(shí)間點(diǎn)計(jì)算,。也就是說調(diào)釋制劑的相關(guān)系數(shù)f2只有這4-6個(gè)時(shí)間點(diǎn)就可以,，沒有必要取10個(gè)或8個(gè)時(shí)間點(diǎn)，我這樣理解對嗎,？

謝老師：

計(jì)算f2因子時(shí),，n值的貢獻(xiàn)比較大，會出現(xiàn)n值較大,，計(jì)算結(jié)果錯誤地偏高,。故日本溶出度試驗(yàn)指導(dǎo)原則中明確規(guī)定n值不得大于6。建議嘗試一下,，觀測結(jié)果跟n值的關(guān)系如何,。

問題四、我在做一個(gè)水溶性差的藥物的片劑,，藥典上規(guī)定的溶出條件是：漿法,，50轉(zhuǎn),，0.1mol/LHCl,；現(xiàn)在我想做一個(gè)原料藥的溶出情況的對照，我采用的是上述條件,，然后將適量原料藥直接放入介質(zhì)中,，在不同時(shí)間點(diǎn)取樣來繪制溶出曲線。請問通過這樣的試驗(yàn)?zāi)苷f明原料藥在介質(zhì)中的溶出情況嗎,？能跟我們做出來的片劑做對照嗎,？如果不行，應(yīng)怎樣設(shè)計(jì)試驗(yàn),？

謝老師：

采用原料藥做出來的溶出曲線是不能夠與成品制劑進(jìn)行對比研究的,。其測定通常有以下兩種用途：
(1)評價(jià)原料藥自身特性對溶出度的影響，如粒徑,、晶型,、顆粒形狀,、比表面能等參數(shù)。
(2)評價(jià)不同制劑工藝/處方/輔料制成的中間體對于原料藥溶出的改善程度,。通過對以上各參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化與篩選來為制劑研發(fā)奠定基礎(chǔ),。

問題五、非那雄胺片的溶出度實(shí)驗(yàn)中分別對微孔濾膜0.45um,、0.8um規(guī)格做了回收實(shí)驗(yàn),，在棄去初濾液10ml后，發(fā)現(xiàn)其回收率都低于98%,。不符合要求,，但是當(dāng)增加初濾液的體積到25ml時(shí)，回收率可以達(dá)到98%,，但依然存在有一片或者兩片低于此值,。當(dāng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到這里的時(shí)候，我有點(diǎn)不知所措了,！是繼續(xù)對不同品規(guī)的濾膜做回收,，還是改方法取離心沉淀的上清液作樣品液呢？ 

謝老師：

很高興看到您的提問,。關(guān)于這一問題的原理我本人撰寫的“溶出度測定中應(yīng)注意的若干問題”一文中“2.2 過濾時(shí)的損失”有詳細(xì)論述,。此類小規(guī)格制劑、由于主成分經(jīng)微粉化處理后與濾膜間有一個(gè)吸附飽和過程,，而該過程又會因不同品牌的濾膜有所差異,，故即便驗(yàn)證了不同品牌的濾膜和初濾液棄去的體積數(shù)，也不敢保證實(shí)際測定時(shí)會遇到的各種復(fù)雜情況,。因此建議采用“離心法處理”,。對于該種處理的異議主要是“離心會導(dǎo)致取出液中的樣品繼續(xù)溶出的顧慮”，其實(shí)此概率存在的可能性是極其微小的,，即便存在亦不會給實(shí)際測定結(jié)果帶來顯著性影響,。如欲驗(yàn)證，可采用不同轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間予以明辨,，觀測其是否有不斷增加趨勢,。介于以上考慮，故質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中擬定離心法的品種我在藥檢所看到過很多,，故請放心采用,！其實(shí)有更為“藝高人膽大”的作法：取出后靜置一段時(shí)間直接進(jìn)樣（省略了離心繁瑣步驟）！因?yàn)槿绱诵∫?guī)格制劑,，取出后樣品中存在的輔料顆粒堵塞色譜柱的概率亦是極其微小的,。我本人自行試驗(yàn)和在日本學(xué)習(xí)期間，皆曾如此操作過，幾百針過后皆平安無事,，不信一試,！

問題六、我在做緩釋片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),。對于方法學(xué)驗(yàn)證中的“范圍”這一項(xiàng)有點(diǎn)疑惑,。我對范圍驗(yàn)證都是做的限度濃度點(diǎn)的回收率試驗(yàn)，這樣做有時(shí)就和“準(zhǔn)確度”驗(yàn)證有部分重合,，不知這樣做是否正確,？還有一點(diǎn)，對于釋放度的方法學(xué)驗(yàn)證中“范圍”這一項(xiàng)的驗(yàn)證,，方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則中說“對于釋放度,，如規(guī)定限度范圍為，從1小時(shí)后為20％至24小時(shí)后為90％,，則驗(yàn)證范圍應(yīng)為0～110％,。” 對于下限0％，該采用什么方法進(jìn)行驗(yàn)證,？我擬采用的方法（1）采用空白片,，充分溶解于釋放介質(zhì)，測定釋放度（理論應(yīng)為0％）,，測定六個(gè)空白片樣品,，報(bào)告數(shù)據(jù)及RSD?；蛘撸?）棄去0％這一點(diǎn),，驗(yàn)證釋放度10％、60％,、110％三個(gè)點(diǎn),，每個(gè)點(diǎn)做三個(gè)不同濃度的式樣，各測定3次,，即測定9次,，報(bào)告已知加入量的回收率（%)。不知這樣考慮是否正確,，還是應(yīng)該采用其他方法,。

謝老師：

其中所涉及的均為溶出度測定法的“方法學(xué)驗(yàn)證內(nèi)容”,。我們有時(shí)往往把問題復(fù)雜化,，其實(shí)如下簡便操作即可：
(1) 線性試驗(yàn)：在溶出量為10%~120%間設(shè)計(jì)5個(gè)點(diǎn)（如10%、20%,、40%,、80%和120%），驗(yàn)證相關(guān)系數(shù)大于0.999即可；當(dāng)然溶出曲線研究時(shí),，小溶出量大于10%,。
(2) 精密度試驗(yàn)：將溶出量分別為10%、40%和100%三個(gè)濃度溶液,，各測定5~6次,，計(jì)算RSD，皆小于2.0%即可,；
(3) 準(zhǔn)確度試驗(yàn)/回收率試驗(yàn)：取對照品配制成10%,、20%、40%,、80%和120%五個(gè)濃度溶液,，其中皆分別加入溶出量為100%時(shí)對應(yīng)的輔料量，測定回收率,，平均回收率在98.0%~102.0%即可,。
(4)《方法驗(yàn)證技術(shù)指導(dǎo)原則》中所述“對于釋放度，如規(guī)定限度范圍為,，從1小時(shí)后為20％至24小時(shí)后為90％,，則驗(yàn)證范圍應(yīng)為0～110％”，太過于理論化與書本化了,，勿“生搬硬套”,！

問題七、我們現(xiàn)在研制的一個(gè)片劑,，主藥不溶于水,，也不溶于0.1mol/L的鹽酸溶液。在這兩種介質(zhì)中溶出度很低,，45分鐘達(dá)不到30％,。而且在水和鹽酸溶液中加入表面活性劑后，溶出度還是很低,，那么這種情況下,，在水和鹽酸兩種溶出介質(zhì)中，怎么樣來進(jìn)行研制產(chǎn)品和原研品種的溶出度比較呢,？

謝老師：

建議您詳細(xì)閱讀一下本人撰寫的“溶出曲線的測定與比較”一文,，測定時(shí)間：在酸性介質(zhì)中2小時(shí)、在其他所有介質(zhì)中6小時(shí),。

放寬試驗(yàn)參數(shù)步驟：首先增加轉(zhuǎn)速至75轉(zhuǎn)/槳板法或120轉(zhuǎn)/轉(zhuǎn)籃法,，再增加表面活性劑濃度直至3.0%，如仍未果,，再增加轉(zhuǎn)速至100轉(zhuǎn)（皆采用槳板法,，不再采用轉(zhuǎn)籃法）,。評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)不是以45分鐘達(dá)70%計(jì)，而是以連續(xù)兩點(diǎn)溶出率均達(dá)90%以上,、且差值在5%以內(nèi)時(shí),，試驗(yàn)則可提前結(jié)束。

如果質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中擬定取樣時(shí)間點(diǎn)為60分鐘或90分鐘,，甚至120分鐘（日本就有很多品種如此擬定）,，這實(shí)則是要求更高！而我國質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)絕大部分皆擬定為30分鐘或45分鐘,，這是“要求太低的表現(xiàn)”,！還望您深入理解為盼！ 

問題八,、我們做的一個(gè)片劑,，素片做崩解時(shí)限16分鐘，按藥典要求,，不合格,。但是按標(biāo)準(zhǔn)檢查溶出度，30分鐘取樣溶出95%左右,。按照藥典規(guī)定,，做了溶出度檢查的樣品不再進(jìn)行崩解時(shí)限的檢查，是不是可以判定本品合格,。 

謝老師：

的確有這樣品種：按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的溶出度試驗(yàn)合格,，而崩解時(shí)限不合格。其實(shí),、這個(gè)現(xiàn)象是很正常的,，只要搞清楚質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中何時(shí)應(yīng)擬定崩解時(shí)限、何時(shí)應(yīng)擬定溶出度檢查后（請參照本貼中之前的回復(fù)以及所上傳的文章內(nèi)容）即可迎刃而解了……本品*可判定為“合格”,！

問題九,、關(guān)于溶出延遲現(xiàn)象解釋，我有點(diǎn)疑問：

（1） 為什么要對有這種現(xiàn)象的片子進(jìn)行校正后才能比較呢,？不校正就不可以比較嗎,？

謝老師：

經(jīng)查《日本仿制藥生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則——疑難解答》中如此表述：當(dāng)參比制劑有溶出延遲滯后現(xiàn)象時(shí)，不一定必須對溶出曲線采用延遲時(shí)間校正后再行比較,，直接比較亦是可以的,。但前提是仿制制劑與參比制劑的延遲滯后時(shí)間差必須在10分鐘以內(nèi)。
【注】由于日本仿制藥眾多,、故日本厚生省藥品管理局陸續(xù)出臺了  《仿制藥生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則（主要針對固體制劑,、其中有詳盡的溶出度研究方法）》、  《含量規(guī)格不同的口服固體制劑生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則》,、  《口服固體制劑處方變更（含其他變更）后生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則》,、《固體制劑改變劑型后生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則》,，以及這些指導(dǎo)原則的《疑難解答》,。本人于去年上半年翻譯了以上所有內(nèi)容的新版（2007年版）,、并加入了個(gè)人注解與詮釋，共六萬五千字,。國家藥監(jiān)局新藥審評中心內(nèi)部刊物《藥品審評論壇》于2008年第3期刊登了其中的  《仿制藥生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則》,。 “采用延遲時(shí)間校正溶出曲線的具體實(shí)例”屆時(shí)請?jiān)斠姟斗轮扑幧锏刃栽囼?yàn)指導(dǎo)原則——疑難解答》部分。

（2）在溶出試驗(yàn)時(shí),，配制難溶性藥物對照品溶解,，先用有機(jī)溶劑溶解，然后用其它介質(zhì)定容,，是不是只用目測不混濁等就認(rèn)為*溶解呢,？

謝老師：

是的。肉眼觀察,，輕微振搖時(shí)無任何固體顆粒懸浮,、即可。建議勿采用“有機(jī)溶劑溶解,，再用溶出介質(zhì)定容”的方式,。而是采用：有機(jī)溶劑溶解并配制成一個(gè)高濃度的濃溶液在一容量瓶內(nèi)，隨后精密量取適量分別用多種溶出介質(zhì)稀釋的方式,；同時(shí)該濃溶液還可放置在冰箱內(nèi)保存以待其后使用,，如此便可做到“事半功倍”！