AlphaLISA表觀遺傳學(xué)試劑是由Alpha技術(shù)所延伸出來的便利產(chǎn)品，可適用于偵測Peptide或Full-length型式的Histone蛋白,。具有高度專一性,，可藉由偵測各種后轉(zhuǎn)譯修飾類型的Histone蛋白,，定量組蛋白密碼(histone code)調(diào)控者(例如Acetyltransferase, Methyltransferase, Deacetylase, Demethylase)的酵素活性,。與ELISA產(chǎn)品相比,，AlphaLISA偵測試劑具有更加寬廣的偵測區(qū)間,，可減少樣品稀釋比例的測試步驟,；并且具有更精簡快速的實驗流程,，讓研究者能夠更快取得定量結(jié)果。

AlphaLISA表觀遺傳學(xué)試劑作用原理：

AlphaLISA 偵測技術(shù)是由兩種核心物質(zhì)所組成,，一為Donor bead,，另一為Acceptor bead。Donor bead 本身身帶有光敏感物質(zhì)"Phthalocyanine"，因此當以680 nm 雷射光激發(fā)Donor bead 時,，此光敏感物質(zhì)可催化周遭的氧分子形成活化態(tài),，并于作用范圍內(nèi)激發(fā)鄰近的Acceptor bead 產(chǎn)生化學(xué)冷光反應(yīng)，此冷光能量會進一步轉(zhuǎn)移至Acceptor bead 本身所帶有的螢光物質(zhì),，使其終產(chǎn)生615 nm 螢光訊號,。與其他偵測平臺相比(例如FRET、TR-FRET),，AlphaLISA 技術(shù)的能量轉(zhuǎn)移有效距離長達200 nm,，因此不論是勝肽、重組蛋白,、或是細胞內(nèi)原始含有的蛋白質(zhì),，皆可作為實驗偵測對象。具有專一性佳,、靈敏度高,、偵測區(qū)間廣泛以及流程簡單等多項優(yōu)質(zhì)特點。

在進行實驗時,，研究者僅需自行準備(1). 待測酵素與輔因子(cofactor),、(2). 鍵結(jié)有Biotin 的Histone peptide substrate (或Histone 全長蛋白)，即可開始進行實驗,。此兩項所需試劑在產(chǎn)品應(yīng)用文件中皆有詳盡的建議資訊,，因此研究者可安心參照選購。

AlphaLISA anti-histone H3 K9me2 antibody Acceptor beads的專一性測試結(jié)果證實此試劑的確能夠?qū)Ｒ恍缘乇孀R偵測H3K9me2 biotinylated peptide,，并且無論是H3K9me1 peptides、H3K9me3 peptides,、methylated H3K4 peptides,、unmodified H3 peptides，皆無法干擾反應(yīng)產(chǎn)生偽陽性結(jié)果,。

所有Alpha系列的Histone modification偵測試劑,，皆實際使用特定酵素進行完整測試，具有詳盡的測試條件與實驗流程可供參照,。使用G9a Histone H3-Lysine N-methyltransferase所進行的酵素用量和時間反應(yīng)測試結(jié)果,，受測產(chǎn)品為Anti-methyl-Histone H3 Lysine 9 (H3K9me2) AlphaLISA® Acceptor Beads (需同時搭配Alpha Streptavidin Donor beads等產(chǎn)品使用)。其他測試項目包含：Cofactor titration (ex, SAM),、Enzyme inhibition,、Z'-factor determination.