構(gòu)建帶有UMT的Illumina NGS文庫

來源：重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 2020年11月10日 15:22

構(gòu)建帶有UMT（Unique Molecular Tags）的Illumina NGS文庫

ThruPLEX^® Tag-seq Kit

· 可信賴的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。ThruPLEX Tag-seq 技術(shù)提供了多達(dá)1,600萬個(gè)分子標(biāo)簽來糾正測序誤差,，
   提供可信的變異檢測分析,。
· 發(fā)現(xiàn)更多,，成本更低,。結(jié)合基于雜交技術(shù)的目標(biāo)序列富集系統(tǒng)可分析數(shù)百個(gè)基因,，同時(shí)分析突變和結(jié)構(gòu)變異,。
· 每次都可獲得高質(zhì)量文庫,。單管操作，2小時(shí),，3步操作流程,。使用簡便，可減少使用者操作誤差和污染發(fā)生,。
· 省時(shí)的生物信息學(xué)分析方案,。采用Curio Genomics提供的云服務(wù)軟件或開源軟件可以快速獲得
   研究結(jié)果。
· 珍貴樣品分析成為可能,。更低的DNA起始量,，以往由于起始量太低而不能分析的樣品也可以分析了。
   ThruPLEX Tag-seq可以1 ng至50 ng cfDNA或片段化的dsDNA起始,，兼容多種樣品類型,。

■ 產(chǎn)品說明：

ThruPLEX Tag-seq采用帶有特別分子標(biāo)簽（UMT）的ThruPLEX引物構(gòu)建帶有分子標(biāo)記和樣品檢索引物的Illumina NGS文庫。每個(gè)試劑盒包含超過1,600萬個(gè)特別序列用于在擴(kuò)增前標(biāo)記每條DNA小片段，可以在文庫制備,、目標(biāo)富集和數(shù)據(jù)分析過程中追蹤DNA小片段,，以檢測低豐度等位基因或計(jì)數(shù)獨(dú)立片段。采用ThruPLEX 技術(shù)設(shè)計(jì)及優(yōu)化,，可以1到50 ng DNA起始構(gòu)建高多樣性,、高重復(fù)性文庫。整個(gè)流程在單管或單孔中就可完成,，只需3步,，2小時(shí)，無需中間純化步驟和樣品轉(zhuǎn)移,，避免了操作誤差和樣品損失,。ThruPLEX Tag-seq Kit 包含所需全部試劑，包括可以多重標(biāo)記96個(gè)樣品的檢索引物,。純化和定量后,，文庫可以采用標(biāo)準(zhǔn)Illumina測序試劑和流程在Illumina NGS平臺進(jìn)行測序。

圖1. 單管,，三步操作流程,。 ThruPLEX Tag-seq Kit以1-50 ng DNA起始構(gòu)建檢索引物文庫只需3步：末端修復(fù)，接頭連接和高保真文庫擴(kuò)增,。無需純化和樣品轉(zhuǎn)移步驟,。簡化的工作流程，在單管或單孔中2個(gè)小時(shí)即可完成,，避免樣品損失,，增強(qiáng)了陽性識別。

圖2. ThruPLEX DNA-seq Kit技術(shù)概要,。ThruPLEX技術(shù)以片段化雙鏈DNA或游離DNA起始,，只需3步反應(yīng)，簡單高效,。

圖3. 減少背景,，結(jié)果更可靠。以30 ng 1% Horizon cfDNA standard,，采用 ThruPLEX Tag-seq構(gòu)建文庫,。Agilent SureSelect富集目標(biāo)區(qū)域，~5,000X覆蓋度測序,，采用Curio Genomics生物信息學(xué)平臺分析數(shù)據(jù),。采用原始數(shù)據(jù)分析，EGFR 的突變（黃色點(diǎn)）會被背景誤差遮蓋（左圖）,。而在數(shù)據(jù)分析過程中使用UMT修正誤差,，突變更容易識別（右圖）,。

圖4. 顯著提高信噪比，發(fā)現(xiàn)更多,。以30 ng（A）或10 ng Horizon cfDNA standard采用ThruPLEX Tag-seq構(gòu)建文庫,，240 KB定制panel（NimbleGen SeqCapEZ）富集目標(biāo)區(qū)域，HiSeq 2500 ~5,000X覆蓋度測序,。Curio Genomics生物信息學(xué)分析平臺進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,。
*數(shù)據(jù)來源于Takara Bio Inc.

■ 產(chǎn)品組成

· Template Preparation Buffer (Red）
· Template Preparation Enzyme (Red）
· Library Synthesis Buffer (Yellow）
· Library Synthesis Enzyme (Yellow）
· Library Amplification Buffer（Green）
· Library Amplification Enzyme（Green）
· Nuclease-Free Water（Clear）
· Indexing Reagent

■ 保存

－20℃

訂購信息

品牌

貨號

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)

TAKARA	R400584	ThruPLEX Tag-seq 6S（12）Kit	12 Rxns
TAKARA	R400585	ThruPLEX Tag-seq 48S Kit	48 Rxns
TAKARA	R400586	ThruPLEX Tag-seq 96D Kit	96 Rxns

更多takara授權(quán)產(chǎn)品，歡迎咨詢,，關(guān)注公眾號：華雅思創(chuàng)生物

相關(guān)產(chǎn)品

免責(zé)聲明

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品,，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任,。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé),，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問題，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。

構(gòu)建帶有UMT的Illumina NGS文庫

免責(zé)聲明

聯(lián)系我們

關(guān)注我們