二手LCMS樣品制備方法
1樣品處理的好壞直接關(guān)系到整個二手LC-MS分析的成敗,，必須要有成熟規(guī)范的樣品制備方法,。

2樣品預(yù)處理各步不能隨意省略，如萃取,、分離,、去鹽等。某些化合物必須進行化學(xué)衍生化以適應(yīng)LC-MS要求,，如磷酸酯水解,。

3若MS信號實在太低，考慮更換樣品前處理方法,。

4濃度非常低的樣品不能保存太長時間,，容器吸附、分解等原因使樣品濃度降低,，標(biāo)準(zhǔn)品工作液現(xiàn)配現(xiàn)用,。

離子化方法選擇：根據(jù)樣品性質(zhì)確定離子化方式適合ESI(IS)的樣品類型。

高極性化合物,、蛋白質(zhì),、肽類，低聚核苷酸等生物分f：-肢類,，季銨鹽等,。
含雜原子的化合物：如氨基甲酸酯等適合APCI的樣品類型。
弱極性沖等極性的小分子,，如脂肪酸,，鋁苯二甲酸等-含雜原子的化合物，如氨基甲酸酶,、脈等ESI不適合的化合物:非極性化合物如苯等,。
APCI不適合的化合物：非揮發(fā)性樣品， 熱穩(wěn)定性差的樣品離子化方法選擇,。

一般情況下
堿性化合物宜用正離子方式
酸性化合物宜用負(fù)離子方式
不明確的化合物,，優(yōu)先試用正離子方式
如未知，可能正,、負(fù)都要試
*有些化合物正,、 負(fù)模式都出峰，選擇靈敏度高的方式。

LC條件的選擇：根據(jù)化合物類型選擇流動相組成,，甲醇水,，么腈水或甲醇-乙。
*某些化合物只有某種流動相體系才出峰,。
*一股正離子方式用甲醇,，負(fù)離子方式用乙腈好些其等。
*通常有機相比例高些,，離子化效率高,。
*梯度的設(shè)定:梯度變化太快對離子化效率影響很大，相應(yīng)源參數(shù)也應(yīng)該改變,，所以當(dāng)恒定比例流動相(即等度分離能滿足分離分析耍求時,，盡量不用梯度，尤其定量分析時,。
*有時,，流動相中加入微量的甲酸或乙酸銨等，可提高正離子化效率,。

LC條件的選擇:
*是否加酸不是的,，具體應(yīng)根據(jù)LC的分離情況、樣品在酸性條件下的穩(wěn)定性等決定,。
通常pH值低時,，[M+H]+ 比率高: pH值高時，[M+Na] +,、[M+K]+,或[M+NH4] +比率會比較高,。
定性分析時，有時加一些NH,，Li+等,，可幫助確定判斷母離子，對碎片較少的化合物,，可以增加其質(zhì)譜特征性,，但會使生物大分子的質(zhì)譜復(fù)雜化。
水的選擇:娃哈哈純凈水比普通蒸餾水好,，若在玻璃瓶中已存放時間太長,，有可能變質(zhì)。當(dāng)本底增大,，LC壓力增高,，應(yīng)更換水相在色譜柱和MS允許情況下，LC流量適當(dāng)提高,，可以壓縮峰寬,，使峰強度提高,。

LC條件的選擇
溶解樣品的溶劑:用與流動相相同的溶劑體系做溶劑，一般水含量較高時,，蜂形好,，通常含水量80-90%。

如果常用的流動相體系不能很好地溶解樣品,可用少量特殊溶劑先將樣品溶解后,，再用流動相稀釋,。

當(dāng)只有粗色譜柱，只能用大流量時可采用三通分流,，以適應(yīng)MS的流量要求選細(xì)色譜柱，如內(nèi)徑2mm,進樣量可以小,，提高相對濃度,，離子化效率，靈敏度,。

換長些的色譜柱,，對定性分離效果好，但分析時間延長,，如峰形仍不理想,，可考慮另選其他型號色譜柱。

當(dāng)不得不用高濃度TFA時,，可在柱后添加并丙醇,，緩解信號抑制問題。柱后衍生化,，有時可增加離子化效率,。

二手LCMS調(diào)機準(zhǔn)備
儀器平衡時間：有條件時盡可能長些，對分析有利,。平衡時需平衡的因素有真空,、溫度、LC流動相比例等,。
容器污染：塑料離心管很容易混入添加劑,，尤其是被有機溶劑浸泡時間較長時，干擾物信號有時會超過待測物,。
LC PUMP脫氣,，先放掉柱前部管路中液體，排凈氣泡,，還要注意儲液瓶液面高度,。