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酶標(biāo)儀與分光光度計的區(qū)別與優(yōu)缺點

來源:上海沛歐分析儀器有限公司   2020年10月15日 13:38  
  酶標(biāo)儀和分光光度計都是實驗室常用的分析測量工具,它們的測定原理是相同的,,都是使用朗伯-比耳定律,,測定的都是樣本的吸光度。
 
  一,、酶標(biāo)儀和分光光度計的三大差別
 
  酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀,。是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器??珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣?大類,,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析,。測定一般要求測試液的終體積在250μL以下,,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求,。
 
  分光光度計,,又稱光譜,是將成分復(fù)雜的光分解為光譜線的科學(xué)儀器,。測量范圍一般包括波長范圍為380~780nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380nm的紫外光區(qū),。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。
 
  同為,,實驗室內(nèi)測定吸光度的儀器,,酶標(biāo)儀和分光光度計存在一些不同之處,具體差別體現(xiàn)在以下三個方面:
 
  (1)盛裝待測溶液的容器:
 
  分光光度計用的是比色皿,,酶標(biāo)儀使用的是塑料微孔板(酶標(biāo)板),。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,每個比色皿一次只能盛裝一種溶液,。酶標(biāo)板常用透明的聚乙烯材料制成,,對抗原抗體有較強的吸附作用,因此用它作為固相載體,,酶標(biāo)板通常為48孔或96孔,,每個微孔可以盛裝不同的溶液。
 
  (2)光路的方向:
 
  分光光度計是水平光路,而酶標(biāo)儀則是垂直光路,。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液,。垂直光的特點是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液面是否水平,、酶標(biāo)板透光性,、孔底是否平整等的影響較大。
 
  (3)光路的長度:
 
  由于光密度(OD值)與吸光系數(shù),待測組分的濃度以及光路長度成正比關(guān)系,。
 
  分光光度計采用的比色杯的寬度通常是1cm,,所以光路長度固定為1cm。因此不同儀器,,不同批次測量的數(shù)據(jù)具有同樣的可比性,。
 
  而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路,所以光路的長度應(yīng)該是液體液面的高度,。所以測得的值受到樣品的體積的影響,。
 
  二、酶標(biāo)儀和分光光度計的優(yōu)缺點比較
 
  分光光度計:
 
  優(yōu)點:1,、檢測波長范圍較寬,;2、加樣量不一致對測量結(jié)果沒有影響,。
 
  缺點:1,、工作量大,操作繁瑣,,耗時,;2、耗試劑,;3,、結(jié)果穩(wěn)定性差,重復(fù)性較差,,誤差較大,;4、對于微量物質(zhì),,難以檢測到,。
 
  主要應(yīng)用領(lǐng)域:藥品檢驗、藥物分析,、環(huán)境檢測,、衛(wèi)生防疫食品、化工,、科研等領(lǐng)域?qū)ξ镔|(zhì)進行定性,、定量分析。
 
  酶標(biāo)儀:
 
  優(yōu)點:1,、一次性處理樣品量大,,省時,;2、樣本,、試劑用量少,;3、操作簡單,,重復(fù)性好,,檢測速度快、效率高,。
 
  缺點:1,、酶標(biāo)儀96孔板在紫外光區(qū)有較強的紫外吸收,應(yīng)盡量避免在300nm以下使用酶標(biāo)儀進行含量測定,;2,、必須確保微孔板每個孔加樣量嚴(yán)格一致,對實驗者的操作技能提出了更高的要求,。
 
  主要應(yīng)用領(lǐng)域:臨床檢驗,、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué),、食品和環(huán)境科學(xué)等,。

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