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當ThruPLEX技術遇上FFPE樣本,,會帶來怎樣的“*操作”,!

來源:重慶市華雅干細胞技術有限公司   2020年10月12日 10:17  

 

 


Formalin Fixed and Paraffin Embedded

FFPE樣本作為生物和醫(yī)學領域的重要樣本來源,廣受研究者的青睞,。由于樣本固定和儲存過程中,,容易發(fā)生核酸的降解和損傷,因此獲得符合測序質量要求的文庫通常很具有挑戰(zhàn)性,。那么面對做DNA-Seq的FFPE樣本,,應該如何應對呢?

“想要隨心所欲的進行FFPE-DNA樣本文庫構建”,,
這個神器值得擁有
?
【SMARTer ThruPLEX DNA-Seq Kit】

“飛一般感覺”的操作

FFPE樣本珍貴,,擔心在文庫制備時損失?選擇它吧,。

該試劑盒利用ThruPLEX技術,,通過使用特殊的莖環(huán)形接頭,實現了更加簡潔高效的實驗流程和更短時間的手動操作。從起始DNA樣本到可用于上機測序的文庫僅需要三步2小時的操作,。特別需要說明的是,,整個操作是在一個反應管中即可完成,中間不需要純化,,能很大程度的減少樣本的污染和損失,!

技術概要:

(圖片來源于Takara Bio Inc.)

“*”的文庫質量

FFPE樣本降解嚴重,害怕不能得到高質量文庫,?選擇它吧,。

Takara嚴謹的數據評測:使用100 ng的FFPE-DNA樣品,分別使用本試劑盒,、A公司試劑盒和B公司試劑盒制備文庫,,然后使用Illumina NextSeq 500(2×76bp)測序分析。相比于其他公司試劑盒,,以FFPE樣品起始時,,使用本試劑盒可以獲得多樣性更好的文庫。另外,,使用本試劑盒制備的文庫,,在不同GC含量范圍內可以產生更均勻的覆蓋分布。

(數據來源于Takara Bio Inc.)

“經得起檢驗”-文獻引用加持

說得好不如做得好,,應用文獻的真實反饋可供參考,,選擇它吧。

2018年7月20日發(fā)表在《npj Genomic Medicine》題為Recurrent loss of heterozygosity correlates with clinical outcome in pancreatic neuroendocrine cancer的文章,。本研究利用全基因組測序技術(WGS)分析了胰腺神經內分泌瘤的拷貝數變異情況,,結果表明,胰腺神經內分泌腫瘤的染色體雜合性的缺失與臨床預后相關,。實驗以3-50 ng的微量FFPE-DNA樣本起始,,使用ThruPLEX-FD Kit(現為ThruPLEX DNA-Seq Kit)制備文庫,并通過WGS與微陣列結果來驗證拷貝數變異(CNV),。

以上內容都佐證了以降解樣本起始時,,使用該試劑盒可以得到高品質的文庫!

所以,,恰好您要用FFPE樣本進行基因組分析,,恰好我有SMARTer ThruPLEX DNA-Seq Kit。世間好物雖多,,但它值得嘗試,!

 重慶市華雅干細胞技術有限公司擁有TAKARA授權Clontech品牌代理,正品現貨,,歡迎咨詢,!

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