隨著生活水平的提高,,食品安全問題受到了人們越來越多的關(guān)注,,其中,,微生物污染是食品安全中主要問題之一,。微生物的檢測方法多種多樣,,傳統(tǒng)的微生物檢測方法不僅耗時,,檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性受實驗條件的影響也不能得到保障,,而近些年得到發(fā)展的快速檢測方法具有耗時少,、靈敏度高,、特異性強等優(yōu)勢,檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性也有了一定的提高,。下面為大家簡單介紹幾種快速檢測微生物的方法,。
01/PCR檢測法
PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫,又稱體外DNA擴增技術(shù),。該方法的原理是提取微生物中的DNA,,將位于兩段已知序列之間的DNA段落進行擴增,,隨后檢測擴增后的DNA序列或者對擴增產(chǎn)物進行跑膠分析,從而判斷是否有微生物污染,。DNA段落的擴增是本方法的核心,,其過程類似于天然DNA的復(fù)制過程,主要包括變性,、退火,、延伸三個循環(huán)步驟。隨著技術(shù)的發(fā)展,,在初的PCR技術(shù)基礎(chǔ)上引進了多種技術(shù),,逐漸發(fā)展出多重PCR、實時熒光定量PCR,、多重實時熒光定量PCR以及PCR-ELISA技術(shù)等,。將PCR技術(shù)應(yīng)用于食品微生物的檢測中,,檢測結(jié)果更加的快速,、靈敏、簡便,、高效,,并且特異性較強。但是該技術(shù)也存在一定的局限性,,即僅對食品微生物中DNA序列已知的微生物進行檢測,。
02/免疫學(xué)檢測技術(shù)
免疫學(xué)方法是基于抗體和抗原的特異性結(jié)合的原理進行檢測,目前食品研究中廣泛使用的免疫學(xué)方法包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),、酶聯(lián)熒光試驗(ELFA)以及免疫磁分離(IMS),。和其他檢測技術(shù)比較,免疫檢測技術(shù)使用的設(shè)備簡單,,檢測成本低,,實用性比較強。例如現(xiàn)在食品檢測中較常用的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù),,它是利用抗原和抗體的特異性反應(yīng),,結(jié)合其顏色變化進行鑒定,是目前通用的免疫測定方法,。當(dāng)前已有市售的ELISA試劑盒,。
03/基因芯片技術(shù)
基因芯片技術(shù)(DNAchip)又稱DNA芯片、DNA微陣列技術(shù),是在20世紀(jì)90年代興起的一種集分子生物學(xué),、生命科學(xué),、計算機科學(xué)等多個科學(xué)于一體的技術(shù)?;蛐酒窃谝粔K微小的基片(硅片,、玻片,、塑料片等)表面集成大量的分子識別探針,如應(yīng)用已知核酸序列作為探針與互補的靶核苷酸序列雜交,,通過對雜交后信號的檢測進行定性與定量分析,。基于此原理設(shè)計微生物靶基因信息,,并利用基因芯片技術(shù)將探針固化,,檢測人員就可以通過將食品與特定探針進行雜交,并對其雜交信號進行檢測,,只需要一次雜交則可以及時檢測出多種靶基因信息,,快速檢測出樣品中的微生物。
該技術(shù)可以同時對多個不同的靶基因進行檢測,,具有高通量,、特異性好、靈敏度高的特點,,在食源性微生物的檢測方面具有很大的應(yīng)用前景,。
04/生物傳感器檢測技術(shù)
生物傳感器檢測的原理是把檢測樣品放入具有生物功能的感應(yīng)元件中,識別其發(fā)生的生物反應(yīng),,并使用信號轉(zhuǎn)換器把生物信號轉(zhuǎn)換成易于傳輸,、測量、處理的電信號,,再經(jīng)檢測放大器放大輸出,,后通過后續(xù)計算得出微生物種類以及濃度。生物傳感器檢測技術(shù)可以從源頭檢測控制食品中微生物情況,,目前已在食品微生物毒素,、農(nóng)獸藥殘留、不法添加物,、食物品質(zhì)等方面得到了廣泛推廣,,為有效減少食品的損失起到了巨大作用。
通過人們對食品微生物的快速檢測技術(shù)和設(shè)備的研究,,檢測速度和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性都有了很大程度的提高和保障,。隨著社會的發(fā)展和科技的進步,將會有越來越高效,、準(zhǔn)確,、簡便、快捷的檢測設(shè)備和檢測技術(shù)被研發(fā)出來,,并應(yīng)用于食品微生物檢測領(lǐng)域,,為人們的食品安全提供強有力的保障。
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