今天開講之前,，先給大家看一組九宮格圖,，開開眼界~~

這是將色譜柱的入口端打開后的樣子，也就是色譜柱中先接觸到樣品的填料,。

正常的色譜柱入口端填料絕大多數(shù)應(yīng)該是白白的,、平整的,，而這些是受到嚴(yán)重污染的色譜柱——變色,、堵塞、雜質(zhì)蓄積......

OMG,！

柱子造的都沒“柱”樣了,！

那怎么辦？

如何避免色譜柱過早地“夭折”呢,？

 辦法還是有滴~~

通常,，在分析柱前面，安裝一支保護(hù)柱就能大大減少損失,。

那么,，今天我們一起來學(xué)習(xí)一下，保護(hù)柱的重要性吧,。

1,、 為什么要使用保護(hù)柱？

2,、 哪些樣品需要使用保護(hù)柱,？

3、 保護(hù)柱會不會影響分離效果,？

4,、 如何選擇保護(hù)柱？

5,、保護(hù)柱的使用及注意事項(xiàng)有哪些,？

01

 為什么使用保護(hù)柱呢？

樣品上機(jī)檢測前,，一般會經(jīng)前處理去除雜質(zhì),，但是不能*避免，來自于樣品及色譜系統(tǒng)的微小的固體顆粒物,、色素雜質(zhì),、未沉淀的蛋白等，可能會滯留在色譜柱中,，從而導(dǎo)致色譜柱耐用性差,、壽命縮短。

保護(hù)柱是安裝在分析柱之前的小柱,，能起到分離凈化的作用,，大大降低分析柱受污染的程度，延長分析柱使用壽命,，因此為您節(jié)省很多的耗材費(fèi)用。

02

 哪些樣品需要使用保護(hù)柱？

常規(guī)的液相色譜檢測中均需要使用保護(hù)柱,，特別是對于食品,、中藥、天然產(chǎn)物,、合成中間體,、復(fù)雜制劑及血漿等生物樣品的檢測，因待測基質(zhì)的復(fù)雜性,，可能會導(dǎo)致色譜系統(tǒng)壓力升高,、色譜柱堵塞、填料變色,、測試結(jié)果不準(zhǔn)確等各種影響,。

03

保護(hù)柱會不會影響分離效果？

通常來講,，理想的保護(hù)柱填料與分析柱填料一致,，具有相同的選擇性，被測物基本上全被洗脫出來,，不會影響待測物的響應(yīng)值,。

保護(hù)柱柱長選擇恰當(dāng)?shù)脑挘粫a(chǎn)生峰擴(kuò)散,，也基本不會引起分離度的降低,。

圖1 是安裝卡套式保護(hù)柱后的對比色譜圖，保留時間略微有延遲（原因是安裝了保護(hù)柱,，色譜柱相當(dāng)于長了一點(diǎn)點(diǎn)）,。總體來講,，卡套式保護(hù)柱對分析結(jié)果基本無影響,。

圖1

【液相條件】
色譜柱：CAPCELL PAK C18 MGIII-H S3; 2.0 mm i.d. x 100 mm
保護(hù)柱：CAPCELL PAK C18 MGIII-H S3; 2.1 mm i.d. x 5 mm
流動相：60%乙腈
流　速：0.5 mL/min
溫　度：40℃
檢　測：UV 254 nm
樣　品：萘（峰4）

04

 如何選擇保護(hù)柱？

1,、保護(hù)柱與分析柱應(yīng)具有相同填料,、相同粒徑、相同內(nèi)徑,，以確保選擇性一致（同一個品牌）,。

2、一般長度為10mm的保護(hù)柱可以起到充分的保護(hù)作用,，過長的話可能會引起待測物的譜帶擴(kuò)張,。

3、盡量選擇可更換柱芯的的保護(hù)柱,，柱芯價格相對便宜,，易于使用和維護(hù),，而且死體積小。

4,、如果是用于UHPLC柱,，還要考慮一下保護(hù)柱的耐壓能力。

05

 保護(hù)柱的使用及注意事項(xiàng)有哪些,？

安裝

1,、卡套式保護(hù)柱一般標(biāo)注液流方向，請按照色譜柱標(biāo)簽所示方向進(jìn)行安裝,，盡量不要雙向混用,。

2、卡套式保護(hù)柱可以更換柱芯,，對于CAPCELL PAK 系列保護(hù)柱,，即使柱芯內(nèi)徑不同，只要柱芯的長度相同,，柱套既可通用,。

3、保護(hù)柱與卡套組裝好后,，請直接連接在色譜柱入口端,。一般用手?jǐn)Q緊卡套即可，如有漏液發(fā)生,，可再使用扳手?jǐn)Q緊30°,，用力太過有可能導(dǎo)致壓環(huán)變形。

使用注意事項(xiàng)

1,、專柱,，避免保護(hù)柱成為不同項(xiàng)目的交叉污染源。

2,、當(dāng)色譜峰的理論塔板數(shù)下降,，柱壓上升，或是關(guān)鍵分離度下降時,，都應(yīng)該及時更換保護(hù)柱,。

3、不慎發(fā)生強(qiáng)污染時,，可以將分析柱卸下,，單獨(dú)沖洗保護(hù)柱，可以使污染物更快的從保護(hù)柱中流出,。

4,、保護(hù)柱或柱芯一般不建議超聲清洗，因可能對填料表面修飾有影響,，當(dāng)柱效下降時直接更換柱芯,。

后,，再給大家介紹2款靠譜的保護(hù)柱吧，一款是應(yīng)用于HPLC的保護(hù)柱,，另一款是應(yīng)用于UHPLC的保護(hù)柱,。

TIPs 知識擴(kuò)展

1 CAPCELL PAK 卡套式保護(hù)柱 （應(yīng)用于HPLC）

產(chǎn)品特點(diǎn)

1、應(yīng)用于高效液相色譜,，CAPCELL PAK 系列分析柱均有配套的保護(hù)柱。

2,、CAPCELL PAK 保護(hù)柱,，即使柱芯內(nèi)徑不同，只要柱芯的長度相同既可通用,。

3,、只對單價較低的柱芯進(jìn)行更換即可實(shí)現(xiàn)對分析柱的保護(hù)。

.2 CAPCELL EXP 卡套式保護(hù)柱 （應(yīng)用于UHPLC）

產(chǎn)品特點(diǎn)

1,、高耐壓 100 MPa,，可用于超高效液相色譜。

2,、幾乎無擴(kuò)散,，對分離的影響降低到極低限度。

3,、可直接連接到色譜柱上,，不會產(chǎn)生死體積的影響。

4,、不需要工具,，用手?jǐn)Q緊即可簡便連接。