柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞,、柱效,、分離效果及保留時間等密切相關(guān)。

所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個恒定值而是指壓力波動范圍在345kPa 以內(nèi)或在50PSI之間（在使用梯度洗脫時,，柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的）,。壓力過高、過低都屬于柱壓問題,。

 1 壓力過高

這是高效液相在使用中常見的問題,，指的是壓力突然升高。

1).一般都是由于流路中有堵塞的原因,。此時,，我們應(yīng)該分段進行檢查。

(1).首先斷開真空泵的入口處,，此時PEEK管里充滿液體,，使PEEK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下,，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過濾頭堵塞,。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個小時,，在用超純水沖洗干凈,。如果液體自由滴下，溶劑過濾頭正常,，在檢查,；

(2).打開Purge閥，使流動相不經(jīng)過柱子,，如果壓力沒有明顯下降,，則是過濾白頭堵塞。處理方法：將過濾白頭取出,，用10%的異丙醇超聲半個小時,。如果壓力降至100PSI以下，過濾白頭正常,，在檢查,；

(3).把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降,，則是柱子堵塞,。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常,。如果是一些強保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞,，則要用比現(xiàn)在流動相更強的流動相沖至壓力正常。

假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降,，則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上,，用流動相沖洗柱子。這時,，如果柱壓仍不下降,，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不甚,，很容易造成柱效下降,，所以盡量少用。問題無法解決可考慮更換色譜柱,。

2).流速設(shè)定不正確：可重新設(shè)定正確流量,。

3).流動相配比不正確：不同配比的流動相其黏度系數(shù)不相同，較高黏度的流動相相應(yīng)的系統(tǒng)壓力也大,，如果可能可更換黏度較小的溶劑或重新設(shè)定配比,。

4).系統(tǒng)壓力零點漂移：調(diào)節(jié)壓力傳感器的零點。

2壓力過低

1).一般是由于系統(tǒng)泄漏,，處理方法：尋找各個接口處,，特別是色譜柱兩端的接口，把泄漏的地方旋緊即可。拆下柱子加適當(dāng)力擰緊或襯四氟薄膜,。 

2).泵里進了空氣,，但此時表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn)，忽高忽低,，更嚴重一點會導(dǎo)致泵無法吸上液體,。處理方法：打開Purge閥，用3~5ml/min的流速沖洗,，如果不行,，則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。

3).無流動相流出：檢查儲液瓶中有無流動相,，沉子是否浸在流動相中,，泵是否運行。

4).參比閥未關(guān)閉：將流速降低后關(guān)閉參比閥,。一般降至0.1～0.2mL/min后關(guān)閉參比閥,。