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高效液相色譜的功能特點
液相色譜是一類分離與分析技術(shù)，其特點是以液體作為流動相,，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等,。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中．為了區(qū)分各種方法，根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,，如紙色譜,、薄層色譜和柱液相色譜。
經(jīng)典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右),。分離后的樣品是被分級收集后再進行分析的，使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低,、分析速度慢,，而且操作也比較復(fù)雜。直到20世紀(jì)60年代．發(fā)展出粒度小于10μm的高效固定相,，并使用了高壓輸液泵和自動記錄的檢測器,，克服了經(jīng)典液相色譜的缺點，發(fā)展成高效液相色譜,，也稱為高壓液相色譜,。
高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography，HPLC),，是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,，于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,。因為較小的填充顆粒具有高柱效,，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相,，故又稱高壓液相色譜,。
使用高效液相色譜時，液體待檢測物被注入色譜柱,，通過壓力在固定相中移動,，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,，通過檢測器得到不同的峰信號,，后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì),。高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中,。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,，它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,，適于分析高沸點不易揮發(fā),、分子量大、不同極性的有機化合物,。
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