C18液相色譜柱要求流動(dòng)相具備哪些特點(diǎn)
C18液相色譜柱要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):
a,、對(duì)樣品具有一定的溶解能力,,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長時(shí)間保留在柱中),。
b,、具有一定惰性,,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。
c,、黏度要盡量小,,以便在使用較長的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,,延長液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低黏度),。
d、物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng),。如使用UV檢測(cè)器,,使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制。
e,、沸點(diǎn)不要太低,,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行,。
f,、在配制好后,,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè),,還可以防止微量氧與樣品發(fā)生作用,。
C18液相色譜柱的安裝:
1、液相色譜柱的結(jié)構(gòu):空柱由柱接頭,、柱管及濾片組裝而成,。
在兩端柱接頭內(nèi),柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或?yàn)V網(wǎng)),,用于封堵柱填料不被流動(dòng)相沖出柱外而流失,。空柱各組件均為316#不銹鋼材質(zhì),,能耐受一般的溶劑作用,。但由于含氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性,故使用時(shí)要注意,,柱及連接管內(nèi)不能長時(shí)間存留此類溶劑,,以避免腐蝕。
2,、色譜柱的安裝:
a,、拆開柱包裝盒,確認(rèn)色譜柱的類型,、尺寸,、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑。
b,、擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用,。
c、按柱管上標(biāo)示的流動(dòng)相流向,,將色譜柱的入口端通過連接管與進(jìn)樣閥出口相連接,;柱的出口與檢測(cè)器連接。連接管是外徑為1.57mm,、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管,。在接管時(shí)一定要設(shè)法降低柱外死體積。連接管通過空心螺釘,、壓環(huán)后盡量用力插到底,然后順時(shí)針擰緊空心螺釘,,直到擰不動(dòng)為止,,切記不要用力過大。如色譜柱通過流動(dòng)相加壓后有漏液現(xiàn)象,,請(qǐng)用扳手繼續(xù)順時(shí)針擰1/4圈,,直至不漏液為止,。
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