紫外可見分光光度計(jì)在生物學(xué)的應(yīng)用分析中,,常見的有蛋白質(zhì)含量檢測(cè),;一般是在蛋白質(zhì)的吸收峰上作吸光度測(cè)定,。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)對(duì)紫外光的主要吸收波長為280nm,所以,采用光度測(cè)量模式,,將儀器的波長GOTO 到蛋白質(zhì)的大吸收峰波長280nm 上,,測(cè)試其吸光度大小,就可完成對(duì)蛋白質(zhì)的定量檢測(cè),。
目前,,紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用主要是在定量分析方面。先從生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用來介紹,。它在生命科學(xué)中應(yīng)用非常廣泛,。主要的是以下5 個(gè)方面。
1. 蛋白質(zhì)分析工作中的應(yīng)用
主要的是作蛋白質(zhì)含量檢測(cè),;一般是在蛋白質(zhì)的吸收峰上作吸光度測(cè)定,。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)對(duì)紫外光的主要吸收波長為280nm,所以,,采用光度測(cè)量模式,,將儀器的波長GOTO 到蛋白質(zhì)的大吸收峰波長280nm 上,測(cè)試其吸光度大小,,就可完成對(duì)蛋白質(zhì)的定量檢測(cè),。
2. 核酸分析工作中的應(yīng)用
在核酸分析中的應(yīng)用,主要是用來對(duì)核酸的定量檢測(cè),;因?yàn)楹怂岬奈辗逶?60nm,。我們只要采用光度測(cè)量模式,將紫外可見分光光度計(jì)的波長GOTO 到核酸的大吸收峰260nm 上,,測(cè)試其吸光度大小就是了,。
3. 氨基酸分析工作中的應(yīng)用
主要是用來對(duì)氨基酸的定量檢測(cè)。因?yàn)榘被釋?duì)紫外光的主要吸收波長為230nm,,所以,,我們只要采用光度測(cè)量模式,將儀器的波長GOTO 到氨基酸的大吸收峰230nm 上, 就可測(cè)試其吸光度大小,,從而計(jì)算出氨基酸的含量,。但是,因?yàn)榘被岱治鰰r(shí),,一般是將它溶解在水中,,而水在230 nm 附近有很多干擾吸收線,所以,,在用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)氨基酸分析檢測(cè)時(shí),,要注意防止干擾的問題。
此外,,還需注意:只有少數(shù)氨基酸有紫外吸收,,多數(shù)氨基酸無紫外吸收或很弱,測(cè)定時(shí)要衍生化后再測(cè)。
4. 糖類分析測(cè)試工作中的應(yīng)用
在糖的分析中, 主要是作定量檢測(cè),。因?yàn)樘菍?duì)紫外光的主要吸收波長為218nm,,所以,對(duì)糖類進(jìn)行分析時(shí),,只要采用光度測(cè)量模式,,將紫外可見分光光度計(jì)的波長GOTO 到氨基酸的大吸收峰218 nm上,就可測(cè)試其吸光度大小,,從而計(jì)算出糖的含量,。
5. 多糖分析測(cè)試工作中的應(yīng)用
在多糖的分析中,主要也是作定量檢測(cè),。因?yàn)槎嗵菍?duì)紫外光的主要吸收波長為206nm,,所以,我們只要采用光度測(cè)量模式,,將其波長GOTO 到多糖的大吸收峰206 nm 上,,就可測(cè)試其吸光度大小,從而計(jì)算出多糖的含量,。
但是多糖的分析難度很大,。因?yàn)? 在206 nm 處的時(shí)候,光源(氘燈) 的能量已經(jīng)很弱,,儀器光學(xué)系統(tǒng)的能量輸出也很低,光電倍增管的靈敏度也很低,,206nm 左右的干擾也很大,。所以,用紫外可見分光光度計(jì)作多糖的分析是很難的事,,目前許多科學(xué)家正在研究中,。
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