在一些實驗或者工業(yè)活動中,,會利用液相色譜儀進行實驗物品中一些成分的檢測,。那么液相色譜儀的結(jié)構(gòu)是什么,主要利用的什么原理呢,?
液相色譜儀運用的原理類型
1,、分配柱色譜法
2、吸附柱色譜法
3,、離子交換柱色譜法
4,、凝膠柱色譜法
液相色譜儀的結(jié)構(gòu)組成
系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器,、色譜柱,、檢測器、記錄儀等幾部分組成,。我們主要看看液相色譜儀,、進樣系統(tǒng)和分類系統(tǒng)三部分。
液相色譜儀
液相色譜儀的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),,樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),,在兩相中作相對運動時,,經(jīng)過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),,下面將分別敘述其各自的組成與特點。
進樣系統(tǒng)
液相色譜儀一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,,進樣量是恒定的,。這對提高分析樣品的重復性是有益的。
分離系統(tǒng)
該系統(tǒng)包括色譜柱,、連接管和恒溫器等,。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連接管),,內(nèi)徑為2~5mm,,由"優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,住內(nèi)裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質(zhì)和固定液構(gòu)成).固定相中的基質(zhì)是由機械強度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,,它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去),、多孔性(孔徑可達1000?)和比表面積大的特點,加之其表面經(jīng)過機械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣),,或者用化學法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基,、季胺基、羥甲基,、苯基,、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物,。因此,這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性,。例如,,在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來,。
另外,,固定相基質(zhì)粒小,柱床極易達到均勻,、致密狀態(tài),,極易降低渦流擴散效應?;|(zhì)粒度小,,微孔淺,樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短,。這些對縮小譜帶寬度,、提高分辨率是有益的,。根據(jù)柱效理論分析,,基質(zhì)粒度小,塔板理論數(shù)N就越大,。這也進一步證明基質(zhì)粒度小,,會提高分辨率的道理。
再者,,高效液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60C,,通過改善傳質(zhì)速度,縮短分析時間,,就可增加層析柱的效率,。
液相色譜儀的保養(yǎng)
由于很多時候天氣潮濕,很容易使檢測器精密的光學部件性能受到影響,,導致靈敏度下降或波長檢驗通不過,,更嚴重者:燈電路板、預放大板及CPU板同時被短路擊壞,。而這類情況在干燥的北方地區(qū)則比較少,。由此可見,潮濕氣候?qū)x器損害之大,。
在多雨季節(jié)到來之前,,勿請用戶將儀器調(diào)整放置在通風條件好,濕度低(<70%)的實驗室內(nèi),。同時,,給實驗室配備去濕機,、空調(diào)及通風裝置。表面上看,,雖然增加了支出,,但您的實際回報將大大超出您的支出。
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