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HPLC液相色譜柱在使用過程中易出現(xiàn)的問題和解決辦法
HPLC液相色譜柱是一種高效的分析手段,，是色譜分析系統(tǒng)的“心臟”,，由于被分析樣品種類繁多,，加之樣品基質(zhì)復雜，極易被強保留物質(zhì)污染,。這些強保留物質(zhì)通常難以洗脫,，多次上樣后，聚集在柱頭端,，堵塞篩板,，甚至可能與填料發(fā)生相互作用導致填料變性，這會導致柱效下降,，分離度降低和峰型異常等現(xiàn)象,。
HPLC液相色譜柱在使用過程中易出現(xiàn)的問題和解決辦法
在使用中常見的問題就是柱壓升高，如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,，屬于正?，F(xiàn)象,。但柱壓在使用過程中突然升高（系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外），可能的原因有如下幾點：
(1)柱頭的過濾篩板堵塞或污染,；
(2)柱頭的填料被樣品污染,；
(3)柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑，形成結晶析出,；
(4)流動相pH值過大或過小使固定相結構破壞或溶解,。
解決辦法如下：
(1)如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染，可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,，或者卸下色譜柱頭,，將其放在10%的稀硝酸內(nèi)超聲清洗10分鐘，后再用純水超聲10分鐘,，重新裝入色譜柱。
(2)如確定色譜柱頭的填料被污染,，將柱頭螺絲卸下,，挖出柱內(nèi)前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入,，仔細修復后,，重新安裝上柱頭螺絲。
(3)如確定定是鹽結晶,，用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,，再換高濃度甲醇。
(4)如果因pH值使用不當,，很難恢復,。
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