氣質(zhì)聯(lián)用儀

氣質(zhì)聯(lián)用儀是指將氣相色譜儀和質(zhì)譜儀聯(lián)合起來使用的儀器,。質(zhì)譜法可以進(jìn)行有效的定性分析，但對復(fù)雜有機化合物的分析就顯得無能為力,；而色譜法對有機化合物是一種有效的分離分析方法,，特別適合于進(jìn)行有機化合物的定量分析，但定性分析則比較困難,。因此,，這兩者的有效結(jié)合必將為化學(xué)家及生物化學(xué)家提供一個進(jìn)行復(fù)雜有機化合物高效的定性、定量分析工具,。像這種將兩種或兩種以上方法結(jié)合起來的技術(shù)稱之為聯(lián)用技術(shù),，將氣相色譜儀和質(zhì)譜儀聯(lián)合起來使用的儀器叫做氣-質(zhì)聯(lián)用儀。

基本應(yīng)用

氣質(zhì)聯(lián)用儀被廣泛應(yīng)用于復(fù)雜組分的分離與鑒定，其具有GC的高分辨率和質(zhì)譜的高靈敏度,，是生物樣品中藥物與代謝物定性定量的有效工具,。質(zhì)譜儀的基本部件有：離子源、濾質(zhì)器,、檢測器三部分組成,，它們被安放在真空總管道內(nèi)。接口：由GC出來的樣品通過接口進(jìn)入到質(zhì)譜儀,，接口是氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)的關(guān)鍵,。

GC-MS主要由以下部分組成：色譜部分、氣質(zhì)接口,、質(zhì)譜儀部分（離子源、質(zhì)量分析器,、檢測器）和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),。

一、色譜部分

色譜部分和一般的色譜儀基本相同,，包括柱箱,、氣化室和載氣系統(tǒng)。除特殊需要,，多數(shù)不再裝檢測器,，而是將MS作為檢測器。此外,，在色譜部分還帶有分流／不分流進(jìn)樣系統(tǒng),，程序升溫系統(tǒng)，壓力,、流量自動控制系統(tǒng)等,。色譜部分的主要作用是分離，混合物樣品在合適的色譜條件下被分離成單個組分,，然后進(jìn)入質(zhì)譜儀進(jìn)行鑒定,。色譜儀是在常壓下工作，而質(zhì)譜儀需要高真空,，因此,，如果色譜儀使用填充柱，必須經(jīng)過一種接口裝置-分子分離器,，將色譜載氣去除,，使樣品氣進(jìn)入質(zhì)譜儀。如果色譜儀使用毛細(xì)管柱,，因為毛細(xì)管中載氣流量比填充柱小得多,，不會破壞質(zhì)譜儀真空，可以將毛細(xì)管直接插入質(zhì)譜儀離子源。

二,、氣質(zhì)接口

氣質(zhì)接口是GC到MS的連接部件,。見的連接方式是直接連接法，毛細(xì)管色譜柱直接導(dǎo)入質(zhì)譜儀,，使用石墨墊圈密封（85%Vespel+15%石墨）,，接口必須加熱，防止分離的組分冷凝,，接口溫度設(shè)置一般為氣相色譜程序升溫高值,。

三、質(zhì)譜儀部分

質(zhì)譜儀既是一種通用型的檢測器,，又是有選擇性的檢測器,。它是在離子源部分將樣品分子電離，形成離子和碎片離子,，再通過質(zhì)量分析器按照質(zhì)荷比的不同進(jìn)行分離,，后在檢測器部分產(chǎn)生信號，并放大,、記錄得到質(zhì)譜圖,。

1、離子源

離子源的作用是接受樣品產(chǎn)生離子,，常用的離子化方式有:

電子轟擊離子化(electron impact ionization,，EI)EI是的一種離子源，有機分子被一束電子流(能量一般為70eV)轟擊,，失去一個外層電子,，形成帶正電荷的分子離子(M+)，M+進(jìn)一步碎裂成各種碎片離子,、中性離子或游離基,，在電場作用下，正離子被加速,、聚焦,、進(jìn)入質(zhì)量分析器分析。

EI特點:

⑴,、結(jié)構(gòu)簡單,，操作方便。

⑵,、圖譜具有特征性,，化合物分子碎裂大，能提供較多信息,，對化合物的鑒別和結(jié)構(gòu)解析十分有利,。

⑶,、所得分子離子峰不強，有時不能識別,。

本法不適合于高分子量和熱不穩(wěn)定的化合物,。

化學(xué)離子化(chemicalionization，CI)將反應(yīng)氣(甲烷,、異丁烷,、氨氣等)與樣品按一定比例混合，然后進(jìn)行電子轟擊,，甲烷分子先被電離,，形成一次、二次離子,，這些離子再與樣品分子發(fā)生反應(yīng),，形成比樣品分子大一個質(zhì)量數(shù)的(M+1) 離子，或稱為準(zhǔn)分子離子,。準(zhǔn)分子離子也可能失去一個H2,，形成(M-1)離子。

CI特點

⑴,、不會發(fā)生象EI中那么強的能量交換，較少發(fā)生化學(xué)鍵斷裂,，譜形簡單,。

⑵、分子離子峰弱,，但(M+1) 峰強,，這提供了分子量信息。

3,、場致離子化(fieldionization,，F(xiàn)I) 適用于易變分子的離子化，如碳水化合物,、氨基酸,、多肽、抗生素,、類等,。能產(chǎn)生較強的分子離子峰和準(zhǔn)分子離子峰。

場解吸離子化( field desorption ionization,，F(xiàn)D) 用于極性大,、難氣化、對熱不穩(wěn)定的化合物,。

負(fù)離子化學(xué)離子化(negative ion chemical ionization,，NICI)是在正離子MS的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種離子化方法,，其給出特征的負(fù)離子峰，具有很高的靈敏度(10-15g),。

2,、質(zhì)量分析

其作用是將電離室中生成的離子按質(zhì)荷比(m/z)大小分開，進(jìn)行質(zhì)譜檢測,。常見質(zhì)量分析器有:

四極質(zhì)量分析器(quadrupole analyzer)

原理:由四根平行圓柱形電極組成,，電極分為兩組，分別加上直流電壓和一定頻率的交流電壓,。樣品離子沿電極間軸向進(jìn)入電場后,，在極性相反的電極間振蕩，只有質(zhì)荷比在某個范圍的離子才能通過四極桿,，到達(dá)檢測器,，其余離子因振幅過大與電極碰撞，放電中和后被抽走,。因此,，改變電壓或頻率，可使不同質(zhì)荷比的離子依次到達(dá)檢測器,，被分離檢測,。

扇形質(zhì)量分析器

磁式扇形質(zhì)量分析器(magnetic-sector massanalyzer)被電場加速的離子進(jìn)入磁場后，運動軌道彎曲了,，離子軌道偏轉(zhuǎn)可用公式表示:當(dāng)H,，V一定時，只有某一質(zhì)荷比的離子能通過狹縫到達(dá)檢測器,。

特點:分辨率低,，對質(zhì)量同、能量不同的離子分辨較困難,。

雙聚焦質(zhì)量分析器(double-focusing massassay)由一個靜電分析器和一個磁分析器組成,，靜電分析器允許有某個能量的離子通過，并按不同能量聚焦,，先后進(jìn)入磁分析器,，經(jīng)過兩次聚焦，大大提高了分辨率,。

3,、檢測器

離子阱檢測器(ion trap detector)

原理類似于四極分析器，但讓離子貯存于井中,，改變電極電壓,，使離子向上、下兩端運動,，通過底端小孔進(jìn)入檢測器,。

檢測器的作用是將離子束轉(zhuǎn)變成電信號,，并將信號放大，常用檢測器是電子倍增器,。當(dāng)離子撞擊到檢測器時引起倍增器電極表面噴射出一些電子,，被噴射出的電子由于電位差被加速射向第二個倍增器電極，噴射出更多的電子,，由此連續(xù)作用,，每個電子碰撞下一個電極時能噴射出2~3個電子，通常電子倍增器有14級倍增器電極,，可大大提高檢測靈敏度,。

4、真空系統(tǒng)

由于質(zhì)譜儀必須在真空條件下才能工作,，因此真空度的好壞直接影響了氣質(zhì)聯(lián)用儀的性能,。一般真空系統(tǒng)由兩級真空組成，前級真空泵和高真空泵,。前級真空泵的主要作用是給高真空泵提供一個運行的環(huán)境,，一般為機械旋片泵。高真空泵主要有油擴(kuò)散泵和渦輪分子泵,，目前主要應(yīng)用的是渦輪分子泵

主要性能指標(biāo)

氣質(zhì)聯(lián)用儀的整體性能指標(biāo)主要有以下幾個：質(zhì)量范圍,、分辨率、靈敏度,、質(zhì)量準(zhǔn)確度,、掃描速度、質(zhì)量軸穩(wěn)定性,、動態(tài)范圍。

質(zhì)量范圍指的是能檢測的低和高質(zhì)量,，決定了儀器的應(yīng)用范圍,，取決于質(zhì)量分析器的類型。四極桿質(zhì)量分析器的質(zhì)量范圍下限1~10,，上限500~1200,。

分辨率是指質(zhì)譜分辨相鄰兩個離子質(zhì)量的能力，質(zhì)量分析器的類型決定了質(zhì)譜儀的分辨能力,。四極桿質(zhì)量分析器的分辨率一般為單位質(zhì)量分辨力,。

靈敏度：氣質(zhì)聯(lián)用儀一般采用八氟萘作為靈敏度測試的化合物，選擇質(zhì)量數(shù)272的離子,，以1pg八氟萘的均方根（RMS）信噪比來表示,。靈敏度的高低不僅與氣質(zhì)聯(lián)用儀的性能有關(guān)，測試條件也會對結(jié)果產(chǎn)生一定影響,。

質(zhì)量準(zhǔn)確度為離子質(zhì)量測定的準(zhǔn)確性,，與分辨率一樣取決于質(zhì)量分析器的類型,。四極桿質(zhì)量分析器屬于低分辨質(zhì)譜，質(zhì)量準(zhǔn)確度為0.1u,。

掃描速度定義為每秒鐘掃描的大質(zhì)量數(shù),，是數(shù)據(jù)采集的一個基本參數(shù)，對于獲得合理的譜圖和好的峰形有顯著的影響,。

質(zhì)量軸穩(wěn)定性是指在一定條件下,，一定時間內(nèi)質(zhì)量標(biāo)尺發(fā)生偏移的程度，一般多以24h內(nèi)某一質(zhì)量測定值的變化來表示,。

動態(tài)范圍決定了氣質(zhì)聯(lián)用儀的檢測濃度范圍,。

測定方法

總離子流色譜法(total ionization chromatography，TIC)--類似于GC圖譜,，用于定量,。l反復(fù)掃描法(repetitive scanningmethod，RSM)--按一定間隔時間反復(fù)掃描,，自動測量,、運算，制得各個組分的質(zhì)譜圖,，可進(jìn)行定性,。l質(zhì)量色譜法(masschromatography，MC)--記錄具有某質(zhì)荷比的離子強度隨時間變化圖譜,。在選定的質(zhì)量范圍內(nèi),，任何一個質(zhì)量數(shù)都有與總離子流色譜圖相似的質(zhì)量色譜圖。

選擇性離子監(jiān)測(selected ion monitoring,，SIM)--對選定的某個或數(shù)個特征質(zhì)量峰進(jìn)行單離子或多離子檢測,，獲得這些離子流強度隨時間的變化曲線。其檢測靈敏度較總離子流檢測高2~3個數(shù)量級,。

質(zhì)譜圖--為帶正電荷的離子碎片質(zhì)荷比與其相對強度之間關(guān)系的棒圖,。質(zhì)譜圖中峰稱為基峰，其強度規(guī)定為100%,，其它峰以此峰為準(zhǔn),，確定其相對強度。