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色譜柱和柱色譜，都屬色譜技術(shù)層面,，在說到色譜柱的時候,，往往繞不開柱色譜，但是兩個其實有很大的區(qū)別,。下面我們就來看看兩者具體的差異吧,。
色譜柱概念與結(jié)構(gòu)原理
簡單的說，色譜柱是一種硬件,。如果說色譜是一種分離分析手段,，分離是核心，那么擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱就是色譜系統(tǒng)的心臟,。色譜柱由柱管,、壓帽,、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片),、接頭,、螺絲等組成。
對色譜柱的要求是柱效高,、選擇性好,，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相,、氧化鋁,、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等,，其粒度一般為3,5,7,10μm等,，柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效,；對于同系物分析,，只要500即可；對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子,，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要,。
裝填有固定相用以分離混合組分的柱管，多為金屬或玻璃制作,。有直管形,、盤管形、U形管等形狀,，色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類,，液相色譜通常均采用填充柱，色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,，以及色譜柱的制備和操作條件,。
柱效受柱內(nèi)外因素影響，為使色譜柱達(dá)到更好的效率,，除柱外死體積要小外,，還要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使有非常好的裝填技術(shù),，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,，靠近管壁的部位比較疏松,，易產(chǎn)生溝流,，流速較快，影響沖洗劑的流形,，使譜帶加寬,，這就是管壁效應(yīng),。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,，柱外效應(yīng)對柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng),。
柱色譜概念
柱色譜則是一種技術(shù)，柱色譜法,，又稱層析法,，是一種以分配平衡為機(jī)理的分配方法。柱色譜是在一根玻璃管或金屬管中迸行的色譜技術(shù),，將吸附劑填充到管中而使之成為柱狀,，這樣的管狀柱稱為吸附色譜柱。使用吸附色譜柱分離混合物的方法,，稱為吸附柱色譜,。這種方法可以用來分離大多數(shù)有機(jī)化合物，尤其適合于復(fù)雜的天然產(chǎn)物的分離,。分離容量從幾毫克到百毫克級,，所以，適用于分離和精制較大量的樣品,。
柱色譜原理
在一定條件下,，硅膠與被分離物質(zhì)之間產(chǎn)生作用，這種作用主要是物理和化學(xué)作用兩種.物理作用來自于硅膠表表面與溶質(zhì)分子之間的范德華力.化學(xué)作用主要是硅膠表面的硅羥基與待分離物質(zhì)之間的氫鍵作用,。在吸附柱色譜中,，吸附劑是固定相，洗脫劑是流動相,，相當(dāng)于薄層色譜中的展開劑,。吸附劑的基本原理與吸附薄層色譜相同，也是基于各組分與吸附劑間存在的吸附強弱差異,，通過使之在柱色譜上反復(fù)進(jìn)行吸附,、解吸、再吸附,、再解吸的過程而完成的,。所不同的是，在進(jìn)行柱色譜的過程中,，混合樣品一般是加在色譜柱的頂端,，流動相從色譜柱頂端流經(jīng)色譜柱，并不斷地從柱中流出,。由于混合樣中的各組分與吸附劑的吸附作用強弱不同,，因此各組分隨流動相在柱中的移動速度也不同，終導(dǎo)致各組分按順序從色譜柱中流出,。如果分步接收流出的洗脫液,，便可達(dá)到混合物分離的目的,。一般與吸附劑作用較弱的成分先流出，與吸附作用較強的成分后流出,。
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