不同來源胎牛血清的差別市場上的胎牛血清種類繁多,,魚龍混雜,,很多科研工作者,,特別是剛接觸細胞培養(yǎng)的人,,難以分辨血清質量的優(yōu)劣。本人根據(jù)十多年來血清生產銷售的經驗,,總結如下:
一,、外觀
拿到血清,,zui先接觸的是血清外觀,,對于缺少細胞培養(yǎng)經驗的人來說,外觀的判斷尤為重要
1,、顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl,,實際上,,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血,。
國產血清的采血點很分散,,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,,當然,國產血清也很少有標準意義上的胎牛血清,。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,,因為真正的胎牛血清凝血功能差,,紅細胞容易破裂,。
總的來說,國產的血清呈現(xiàn)出蠟黃,。進口的血清,,質量zui好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,,如Gibco 16000,,差點的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當然,,熱滅活血清或保存不當?shù)难?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅,,甚至咖啡色,。
2、沉淀
很多血清客戶,,會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據(jù)的,。
血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,,和廠家的加工生產方式密切相關,。
國產的血清,大多來自北方,,由于價格低廉,,保存環(huán)境都不好,從采血,、冷凍,、運輸?shù)缴a會經過多次凍融,,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,,很少有沉淀產生,。
進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復凍融,,生產后的成品也是清澈的,,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀,。當然,,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,,生產后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀,。
當然,,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,,融化過程zui好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質量,,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙,。
3、澄清度
進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,,表現(xiàn)為稀薄,、清淡,而國產血清,,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,,相對而言更加粘稠,顏色略深,,這對于初步接觸血清的人很難判斷,,但把兩者進行對比,可容易分辨,。
二,、主要技術指標
目前國內血清的質量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》,主要指標有以下幾點:
1,、內毒素
標準為不高于5EU/ml,。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,,因此內毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前,,國產血清基本都能達到這一要求,,很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高,如Gibco 26140,,只要求不高于50EU/ml,,高出我國標準10倍,即使是16000,,也要10EU/ml,,血清質量也未見影響??梢?,內毒素含量偏高不影響質量,除非含量*,,預示著已經污染,。
2、總蛋白含量
胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,,數(shù)值偏高,,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,,數(shù)值偏低,,表明血清可能摻水了。
3,、血紅蛋白
標準為不高于20mg/dl,,顏色越紅,數(shù)值越高,,反之,,數(shù)值越低。
4,、pH
國產血清,,大多高于7.5,進口胎牛血清,,大多低于7.5,,具體原因未知,可能和牛齡有關,,這也能用來初步鑒別血清的來源,。
5、微生物
包括細菌,、霉菌,、支原體,、噬菌體、各類病原性病毒等,。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,,支原體經過0.1um過濾,,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,,主要是生產環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,,很難*清除,,但對血清質量影響不大。病原性病毒,,特別是BVDV,,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,,而進口胎牛血清中基本都控制的很好,。
6、免疫球蛋白
國產血清的只是定性檢測,,結果也很不準確,,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時的牛齡情況,,國產血清,,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,,IgG的含量也偏高,,進口胎牛血清,不含IgM,,IgG的含量也較低,。
7、其它
不管是國產還是進口血清,,都是不測抗生素的(無四環(huán)素胎牛血清除外),。國外,抗生素的使用很嚴格,,用量也很少,,每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低,;國內,,抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象,,血清中殘留很高,對細胞培養(yǎng)極為不利,,這是國產血清質量差的根本原因,。
三、血源
市場上的血清血源主要分為中國,、北美,、南美和澳洲。
1,、國產血清質量差,,這是*的,主要原因并不是生產廠家的責任,,而是天然環(huán)境差和抗生素的大量使用,。國內環(huán)境污染嚴重,同時飼養(yǎng)過程中抗生素極其濫用,,有毒有害物質會大量殘留在血清中,,zui終不利于細胞的生長。
2,、南美血清,,來源很多,如Bioind的巴拿馬,、Gibco的烏拉圭,、巴西等,這些血清由于采血的不可控性,,質量參差不齊,,當然,相對于國內血清來說好的多,。另外,,國內銷售的南美血清大多顏色鮮紅,如Bioind,、Gibco,、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,,這可能和各國的采血,、生產工藝有關。
3,、北美血清,,主要來自美國和加拿大,如Hclone的SH30396,、SH30070,、SH30071,、Gibco的16000-044、26140-079等,。這類血清,等級越高的顏色越淡,,表現(xiàn)為淡黃中帶一點微紅,,SH30070和SH30396對比就很明顯,特級胎牛血清基本就能進行干細胞培養(yǎng),。北美血清還有一個顯著特點就是每瓶血清都能溯源,,這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要,。
4,、澳洲血清,來源主要是新西蘭和澳大利亞,,這是在北美血清禁運之后進入中國市場的,一般不具有溯源功能,,由于生產,、運輸?shù)仍颍瑑r格相對來說比較貴,。拿Gibco的10099和16000相比較,,后者質量等級更高,顏色更淡,,性價比更高,。
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,,未經本網(wǎng)授權不得轉載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網(wǎng)授權使用作品的,,應在授權范圍內使用,,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關法律責任,。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體,、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容,、版權等問題,,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利,。