早在20世紀初,，植物學家Mikhail Tsvet為了分離植物中天然色素,，設計了早的色譜實驗：碳酸鈣被置于玻璃管中,，石油醚被選作流動相，不同的色素按疏水性由強至弱的順序被洗脫,。經過數十年的發(fā)展,，5um~10um大小的球形硅膠顆粒，也就是現(xiàn)在被廣泛應用于HPLC系統(tǒng)的商品化色譜柱才開始大規(guī)模生產,。與Tsvet實驗類似的色譜模式,，被稱為正相色譜（normal phase chromatography）。相對應的,，組分的洗脫順序相反,，疏水性強的化合物更晚被洗脫的情況，則被稱為反相色譜（reversed-phase chromatography）,。反相色譜已經成為了現(xiàn)今應用廣泛的色譜模式,。為了在反相色譜體系中達到理想的分離效果，我們對固定相,、流動相,、溫度等等參數一一進行優(yōu)化。接下來我們將討論一個簡單情況：各組分按疏水性差異被依次洗脫,。

        今天的主角：C18,。C18現(xiàn)今的“江湖地位”可以說是天時、地利,、人和三者相互結合的結果： 

   C18分子本身與樣品組分,，進行簡單的疏水相互作用，不受二級作用（例如,，氫鍵）的干擾,。當目標組分被流動相帶入硅膠孔隙中，依據疏水性的差異,，不同組分在固定相上“停留”的時間也不同,。

   C18與硅膠也堪稱天作之合。通常情況下,，硅膠基質色譜填料,，通過硅烷化試劑與硅膠表面的硅羥基進行縮合反應，以達成化學鍵合,。而各類單功能團硅烷之中,，十八烷基二甲基氯硅烷的鍵合反應相對更容易控制。C18在自然狀態(tài)下非常穩(wěn)定，小于18個碳原子的直鏈烷烴在物理性質上傾向于液體,，不易控制,。

      C18提供的疏水選擇性“剛剛好”。既不會由于C鏈過長導致容易吸附樣品（主要還是針對小分子來說,，大分子仍舊容易在C18吸附）,，也不會因為疏水性不足而導致無法分離各組分。

     由此可見,，在使用C18色譜柱時,，組分在流動相中的狀態(tài)應當成為我們時刻關注的一個重要點。