早在20世紀(jì)初,，植物學(xué)家Mikhail Tsvet為了分離植物中天然色素,，設(shè)計(jì)了早的色譜實(shí)驗(yàn)：碳酸鈣被置于玻璃管中，石油醚被選作流動(dòng)相,，不同的色素按疏水性由強(qiáng)至弱的順序被洗脫,。經(jīng)過(guò)數(shù)十年的發(fā)展，5um~10um大小的球形硅膠顆粒，也就是現(xiàn)在被廣泛應(yīng)用于HPLC系統(tǒng)的商品化色譜柱才開(kāi)始大規(guī)模生產(chǎn),。與Tsvet實(shí)驗(yàn)類似的色譜模式,，被稱為正相色譜（normal phase chromatography）。相對(duì)應(yīng)的,，組分的洗脫順序相反,，疏水性強(qiáng)的化合物更晚被洗脫的情況，則被稱為反相色譜（reversed-phase chromatography）,。反相色譜已經(jīng)成為了現(xiàn)今應(yīng)用廣泛的色譜模式,。為了在反相色譜體系中達(dá)到理想的分離效果，我們對(duì)固定相,、流動(dòng)相,、溫度等等參數(shù)一一進(jìn)行優(yōu)化。接下來(lái)我們將討論一個(gè)簡(jiǎn)單情況：各組分按疏水性差異被依次洗脫,。

        今天的主角：C18,。C18現(xiàn)今的“江湖地位”可以說(shuō)是天時(shí)、地利,、人和三者相互結(jié)合的結(jié)果： 

   C18分子本身與樣品組分,，進(jìn)行簡(jiǎn)單的疏水相互作用，不受二級(jí)作用（例如,，氫鍵）的干擾,。當(dāng)目標(biāo)組分被流動(dòng)相帶入硅膠孔隙中，依據(jù)疏水性的差異,，不同組分在固定相上“停留”的時(shí)間也不同,。

   C18與硅膠也堪稱天作之合。通常情況下,，硅膠基質(zhì)色譜填料,，通過(guò)硅烷化試劑與硅膠表面的硅羥基進(jìn)行縮合反應(yīng)，以達(dá)成化學(xué)鍵合,。而各類單功能團(tuán)硅烷之中,，十八烷基二甲基氯硅烷的鍵合反應(yīng)相對(duì)更容易控制。C18在自然狀態(tài)下非常穩(wěn)定,，小于18個(gè)碳原子的直鏈烷烴在物理性質(zhì)上傾向于液體,，不易控制。

      C18提供的疏水選擇性“剛剛好”,。既不會(huì)由于C鏈過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致容易吸附樣品（主要還是針對(duì)小分子來(lái)說(shuō),，大分子仍舊容易在C18吸附），也不會(huì)因?yàn)槭杷圆蛔愣鴮?dǎo)致無(wú)法分離各組分,。

     由此可見(jiàn),，在使用C18色譜柱時(shí),，組分在流動(dòng)相中的狀態(tài)應(yīng)當(dāng)成為我們時(shí)刻關(guān)注的一個(gè)重要點(diǎn)。