TMB底物顯色試劑盒(可溶型)說明書
Soluble TMB Kit
目錄號:K0050
保存條件:2-8℃保存,。
組分說明
Cat No. K0050
Volume 100 ml
TMB 5 ml
TMB-顯色液 100 ml
產(chǎn)品簡介
TMB (3', 3', 5', 5', -四甲基聯(lián)苯胺)是辣根過氧化物酶(HRP)的顯色底物,,是目
前HRP系統(tǒng)ELISA實驗的常用顯色試劑,。TMB顯色底物工作液在HRP的催化下,,形成藍色的陽離子產(chǎn)物,,在370 nm和652 nm處有主要吸收峰,。加酸終止反應(yīng)后,,藍色轉(zhuǎn)變為黃色,可以在450 nm波長下測定,。本試劑盒使用方便,,靈敏度高,效果穩(wěn)定,,顏色產(chǎn)物為可溶性,,適用于ELISA,不推薦用于IHC實驗,。
本產(chǎn)品僅供科研使用,,請勿用于臨床診斷及其他用途
注意事項
1.顯色工作液應(yīng)即用即配,,放置超過10 min會影響顯色效果。
2.TMB顏色底物顯色后,,隨著時間的延長,顏色會逐漸消退,,因此顯色并終止反應(yīng)后
應(yīng)盡快讀值,,否則會影響檢測的準確性。
3.以96孔酶標板每孔用量100 μl顯色工作液計算,,5 ml 20×TMB Kit 可完成1000孔樣品的檢測,。
4.本產(chǎn)品僅限于科研,不能用于人體實驗或人體治療,。
操作步驟
1.TMB顯色工作液配制:
根據(jù)實驗需用量,,將TMB和TMB-顯色液以1:19的比例均勻混合,即配制成為TMB顯色工作液,。
2.顯色:
1)經(jīng)HRP標記物孵育并充分洗滌后,,酶標板每孔中加100 μl TMB顯色工作液。
2)室溫避光孵育25-30分鐘,,反應(yīng)產(chǎn)物呈藍色,。
3)每孔加50 μl 0.5M H2SO4 終止顯色,此時藍色產(chǎn)物變?yōu)榱咙S色,。
4)將酶標板置于酶標儀中,,450 nm波長下讀取數(shù)據(jù)。
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