TMB底物顯色試劑盒(可溶型)說(shuō)明書(shū)
TMB底物顯色試劑盒(可溶型)說(shuō)明書(shū)
Soluble TMB Kit
目錄號(hào):K0050
保存條件:2-8℃保存,。
組分說(shuō)明
Cat No. K0050
Volume 100 ml
TMB 5 ml
TMB-顯色液 100 ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
TMB (3', 3', 5', 5', -四甲基聯(lián)苯胺)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的顯色底物,是目
前HRP系統(tǒng)ELISA實(shí)驗(yàn)的常用顯色試劑,。TMB顯色底物工作液在HRP的催化下,,形成藍(lán)色的陽(yáng)離子產(chǎn)物,在370 nm和652 nm處有主要吸收峰,。加酸終止反應(yīng)后,,藍(lán)色轉(zhuǎn)變為黃色,可以在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定,。本試劑盒使用方便,,靈敏度高,,效果穩(wěn)定,顏色產(chǎn)物為可溶性,,適用于ELISA,,不推薦用于IHC實(shí)驗(yàn)。
本產(chǎn)品僅供科研使用,,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途
注意事項(xiàng)
1.顯色工作液應(yīng)即用即配,,放置超過(guò)10 min會(huì)影響顯色效果。
2.TMB顏色底物顯色后,,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),,顏色會(huì)逐漸消退,因此顯色并終止反應(yīng)后
應(yīng)盡快讀值,,否則會(huì)影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性,。
3.以96孔酶標(biāo)板每孔用量100 μl顯色工作液計(jì)算,5 ml 20×TMB Kit 可完成1000孔樣品的檢測(cè),。
4.本產(chǎn)品僅限于科研,,不能用于人體實(shí)驗(yàn)或人體治療。
操作步驟
1.TMB顯色工作液配制:
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需用量,,將TMB和TMB-顯色液以1:19的比例均勻混合,,即配制成為T(mén)MB顯色工作液。
2.顯色:
1)經(jīng)HRP標(biāo)記物孵育并充分洗滌后,,酶標(biāo)板每孔中加100 μl TMB顯色工作液,。
2)室溫避光孵育25-30分鐘,反應(yīng)產(chǎn)物呈藍(lán)色,。
3)每孔加50 μl 0.5M H2SO4 終止顯色,,此時(shí)藍(lán)色產(chǎn)物變?yōu)榱咙S色。
4)將酶標(biāo)板置于酶標(biāo)儀中,,450 nm波長(zhǎng)下讀取數(shù)據(jù),。
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