5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白試劑盒是針對從各種動(dòng)物細(xì)胞中快速高效地抽提分離不同亞細(xì)胞蛋白質(zhì)組份而設(shè)計(jì)的,。運(yùn)用含有不同去污劑的抽提試劑,按照亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)對動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行有序的抽提,,可將細(xì)胞內(nèi)的蛋白依次分離成四部分,,分別是:胞漿蛋白,、細(xì)胞膜和細(xì)胞器膜蛋白、核蛋白,、細(xì)胞骨架(微絲和中等纖維)蛋白和核基質(zhì)蛋白,。可廣泛運(yùn)用于各種相關(guān)的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),,如蛋白質(zhì)(酶)的亞細(xì)胞定位,、內(nèi)(外)源性因子亞細(xì)胞定位以及在細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò)中的作用。
5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白試劑盒對蛋白濃度測定:
蛋白質(zhì)濃度線性檢測范圍為10-2000µg/ml,。標(biāo)準(zhǔn)測定時(shí),,用1cm光程玻璃或塑料比色皿,反應(yīng)終體積1.1ml,,比色計(jì)測定,。微板測定時(shí),用96孔板,,反應(yīng)終體積225µl,,用酶標(biāo)儀、微板比色儀測定,。
標(biāo)準(zhǔn)測定:將0.05~0.1ml標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本與工作溶液混合,。
微板測定:將25µl標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本與工作溶液混合。
37ºC反應(yīng)30min,;也可25ºC室溫2小時(shí)或過夜,。反應(yīng)可增加檢測靈敏度。
將反應(yīng)管冷卻至室溫,。測定562nm光密度(OD)值,。
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。X軸為BSA標(biāo)準(zhǔn)蛋白濃度,,Y軸為各標(biāo)準(zhǔn)管對應(yīng)的OD562值,。用Excel擬合曲線并計(jì)算蛋白濃度。
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