1.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品品質(zhì)受損?
我們建議您將血清從冷凍箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是,,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。
2.保存血清的方法?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃,。然而,,若存放于4℃時,請勿超過一個月,。若您一次無法用完一瓶,,建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,。
3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的品質(zhì)。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜,。
4.為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統(tǒng),。啟動的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,,細胞和血小板釋放組胺,,啟動淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,,培養(yǎng)ES細胞,,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清,。
5.有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的品質(zhì),,而造成細胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37 ℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增,。 因此我們建議您,若非必須,,您可以不需要做熱處理這一步,。如此一來,不但節(jié)省您寶貴的時間,,更確保血清的品質(zhì)!
6.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?
GIBICO的胎牛血清沒有預(yù)老化,,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的品質(zhì),。推薦在-20℃儲存胎牛血清,,避免反復(fù)凍融,。
7.如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作:
•解凍血清時,,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),,若血清解凍時改變的溫度
太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
•解凍血清時,,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。
•請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的品質(zhì),。
•血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,可以無須做此步驟,。
•若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,30分鐘的原則,,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任,。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,,不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任,。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,,并自負版權(quán)等法律責任,。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。