根據(jù)被分離組分和固定液分子間的相互作用關(guān)系，色譜柱固定液的選擇一般根據(jù)所謂的“相似性原則”,。即固定液的性質(zhì)與被分離組分之間的某些相似性,，如官能團(tuán)、化學(xué)鍵,、極性,、某些化學(xué)性質(zhì)等,，性質(zhì)相似時(shí)，兩種分子間的作用力就強(qiáng),，被分離組分在固定液中的溶解度就大,，分配系數(shù)大，因而保留時(shí)間就長(zhǎng);反之溶解度小,，分配系數(shù)小,，因而能很快流出色譜柱。

一般分為以下幾種情況,，

1,、分離極性化合物，采用極性固定液

這時(shí)樣品各組分與固定液分子間作用力主要是定向力和誘導(dǎo)力,，各組分出峰次序按極性順序,，極性小的先出峰，極性越大,，出峰越慢,。

2、分離非極性化合物,，應(yīng)用非極性固定液

樣品各組分與固定液分子間作用力是色散力,，沒(méi)有特殊選擇性，這時(shí)各組分按沸點(diǎn)順序出峰,，沸點(diǎn)低的先出峰,。對(duì)于沸點(diǎn)相近的異構(gòu)物的分離，效率很低,。

3,、分離非極性和極性化合物的混合物時(shí)，

可用極性固定液,，這時(shí)非極性組分先餾出,，固定液極性越強(qiáng)，非極性組分越易流出,。

4,、對(duì)于能形成氫鍵的樣品。

如醇,、酚,、胺和水的分離，一般選擇極性或氫鍵型的固定液,，這時(shí)依組分和固定液分子間形成氫鍵能力大小進(jìn)行分離,。

“相似相容性原則”是選擇固定液的一般原則。

有時(shí)利用現(xiàn)有的固定液不能達(dá)到滿意的分離結(jié)果時(shí)，往往采用“混合固定液”,，應(yīng)用兩種或兩種以上性質(zhì)各不相同的,，按適合比例混合的固定液，使色譜柱分離有比較滿意的選擇性,，又不致使分析時(shí)間延長(zhǎng),。