為了使您的色譜柱能發(fā)揮大的性能,,敬請先閱讀以下說明:
1、 適用類型
Thermo 離子交換色譜柱包括:BioBasic AX,,SCX,,Hypersil SAX,,Hypersil Gold AX,, SAX 等,。
2、 柱體積
色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算:
V = 0.68 πr2L
V 為色譜柱柱體積(mL),,r 為色譜柱內徑(cm),,L 為色譜柱長度(cm)。
3,、 色譜柱柱效測試與保存
離子交換色譜柱出廠時都經(jīng)過柱效測試,,請參考柱效報告,。
在條件允許情況下,,請對新色譜柱進行柱效測試。
離子交換色譜柱出廠時均保存在乙醇溶液中(如有不同,,以柱效報告為準),。
4,、 溫度
所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于 60℃。
5,、 樣品
建議將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中,。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中,。樣品溶液不應含有任何顆粒物,,建議使用 0.5μm 或更小粒徑的濾膜過濾。同時建議在色譜系統(tǒng)中使用在線過濾器,。
6,、 流動相
所用溶劑通常為水、乙腈,、甲醇等,,Thermo 的離子交換色譜柱可以 100%水為流動相, 進行鹽的梯度洗脫,。流動相中含有機相時,,請注意降低鹽的濃度,以防止溶劑混合后鹽從流動相中析出,。更換流動相時也要注意這一問題,,可先用含較高純水的流動相除鹽過渡。請將流動相的 pH 值控制在 2-8,。緩沖鹽濃度在 500 mM 以下,。所有流動相,建議當日實驗當日配制,,并使用 2μm 濾膜過濾,。
7、 色譜柱安裝
請小心操作色譜柱,。
不要摔,、碰色譜柱,這樣會損壞色譜柱床,,使色譜柱性能下降,。使用合適的連接管路和接頭,確保色譜柱連接處死體積降到低(使用不銹鋼接頭時需要尤其注意),。我們建議使用 SLIPFREE 接頭,,此接頭與 Thermo 色譜柱以及其他品牌色譜柱均完美匹配。
8,、 色譜柱平衡
新柱在使用前,,請預先用 20 倍柱體積甲醇/或乙腈沖洗色譜柱,然后以初始流動相(不含鹽)沖洗 10 倍柱體積,。在進行正式分析之前,,請使用至少 20 倍柱體積的流動相沖洗色譜柱,,以使色譜柱達到平衡。
9,、 色譜柱保護
對于成分復雜的“臟”樣品以及組分未知的樣品,,請盡量使用在線濾器或保護柱,如果可能,,使用 SPE 小柱對樣品進行前處理是更好的選擇,。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。
10,、 色譜柱清洗
常規(guī)清洗:每天完成分析之后,,用 100% 水沖洗 30 倍柱體積除鹽,然后用 20% 甲醇/或乙腈沖洗 20 個柱體積,,保存在 20% 甲醇/或乙腈中,。
清洗強保留污染物:如果發(fā)現(xiàn)離子交換色譜柱柱效出現(xiàn)大幅下降,可通過如下方法
清洗離子交換色譜柱:首先用高濃度的緩沖鹽溶液清洗(濃度是流動相的 5-10 倍,,但不得超過 1M),,沖洗 30倍柱體積。用 100% 水沖洗 20 倍柱體積以除鹽后,,再用 100%甲醇/或乙腈清洗 30 倍柱體積,。后用 20%甲醇/或乙腈水溶液(不含鹽)保存。
11,、 色譜柱保存
用 100% 水沖洗 30 倍柱體積除鹽后,,若短期不使用(<1 周),用 20% 甲醇或乙腈沖洗 20 倍柱體積后,,保存在 20% 甲醇/或乙腈中,;若需長期放置(>1周),用 50% 甲醇/或乙腈沖洗 20 倍柱體積后,,保存在 50% 甲醇/或乙腈中,。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,,應在授權范圍內使用,,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,,本網(wǎng)將追究其相關法律責任,。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體,、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任,。
- 如涉及作品內容,、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,,否則視為放棄相關權利,。