生物顯微鏡的分類
1. 按照定位級別分類,。可以分為學生級,、實驗級,、研究級生物顯微鏡,。
2. 按照目鏡的個數(shù)分類。可以分為單目型,、雙目型,、三目型生物顯微鏡。
按照目鏡個數(shù)分類
3. 按目鏡和移動臺的相對位置分類,??梢苑譃檎蒙镲@微鏡和倒置生物顯微鏡。正置(常規(guī))生物顯微鏡的物鏡在移動臺的上方,,倒置生物顯微鏡的物鏡在移動臺的下方,。
按照目鏡和移動臺相對位置分類
4. 按成像原理分類??梢苑譃楣鈱W生物顯微鏡和電子生物顯微鏡,。
光學顯微鏡主要由目鏡、物鏡,、載物臺和反光鏡(集光鏡)組成,。目鏡和物鏡都是凸透鏡,焦距不同,。物鏡的凸透鏡焦距小于目鏡的凸透鏡的焦距。物鏡相當于投影儀的鏡頭,,物體通過物鏡成倒立,、放大的實像。目鏡相當于普通的放大鏡,,該實像又通過目鏡成正立,、放大的虛像。經(jīng)顯微鏡到人眼的物體都成倒立放大的虛像,。
顯微鏡的成像原理
電子顯微鏡是根據(jù)電子光學原理,,用電子束和電子透鏡代替光束和光學透鏡,使物質(zhì)的細微結構在非常高的放大倍數(shù)下成像,。由于電子束的波長遠遠小于可見光的波長,,所以即使電子束的錐角僅為光學顯微鏡的1%,電子顯微鏡的分辨本領仍遠遠優(yōu)于光學顯微鏡,。光學顯微鏡的大放大倍率約為2000倍,,而現(xiàn)代電子顯微鏡大放大倍率已經(jīng)超過了300萬倍 [1] 。
電子顯微鏡
生物顯微鏡的基本結構
生物纖維鏡的結構
1. 鏡座,。位于顯微鏡底部,,用于支持全鏡。
2. 鏡臂,。位于鏡筒后面,,通常為弓形,用于支持鏡筒和搬移顯微鏡時握持部位。
3. 鏡筒,。位于顯微鏡上方,,上接目鏡,下接物鏡轉(zhuǎn)換器,。
4. 物鏡轉(zhuǎn)換器,。位于鏡筒下方的轉(zhuǎn)盤,通常有3~4個圓孔,,可裝配不同放大率的物鏡,,可使每個物鏡通過鏡筒與目鏡構成一個放大系統(tǒng)。
5. 移動臺,。又名載物臺,、工作臺或鏡臺,用于放置標本,。移動臺上有兩個金屬壓片夾叫標本夾,,用于固定玻片標本。有的載物臺上裝有推片器用來移動標本,,有的載物臺本身可以移動,。
6. 調(diào)焦裝置。為了得到清晰的圖像,,必須調(diào)節(jié)物鏡與標本之間的距離,,使物鏡的焦點對準標本,這一操作叫調(diào)焦,。調(diào)焦通過粗準焦旋鈕和細準焦旋鈕來實現(xiàn),。
7. 物鏡。安裝在鏡筒下端的物鏡轉(zhuǎn)換器下方,,因為它靠近被視物體,,故又稱接物鏡。物鏡是決定顯微鏡性能如分辨力的重要的構件,。物鏡的作用是將標本the first次放大成倒像,。一臺顯微鏡備有數(shù)個物鏡,每個物鏡由數(shù)片不同球面半徑的透鏡組成,。物鏡下端的透鏡口徑越小,,鏡筒越長,其放大倍數(shù)越高,;否則反之,。物鏡有低倍物鏡和高倍物鏡,其放大倍數(shù)一般刻在物鏡的鏡筒上,,例如4×,、8×,、10×、……,、100×,,分別表示4倍、8倍,、10倍……,、100倍。其中40-65倍叫高倍物鏡,,90或100倍的稱為油浸物鏡,。
8. 目鏡。安裝在鏡筒上端,,因為它靠近觀察者的眼睛,,又稱接目鏡。目鏡的作用是將由物鏡放大的實像進一步放大成一個起立的虛像,,其作用相當于一個放大鏡,。但它并不增加顯微鏡的分辨力。目鏡的視野內(nèi)有一條黑線,,叫做“指針”,,可以指示所觀察的部位。根據(jù)需要,,目鏡內(nèi)也可安裝測微尺,,用以測量所觀察物體的大小。一般顯微鏡備有幾個放大倍數(shù)不同的目鏡,,其放大倍數(shù)刻在目鏡邊框上,如5×,、10×,、15×等(顯微鏡的總放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù))。
9. 聚光鏡,。安裝在移動臺下方支架上,,主要由聚光鏡和孔徑光闌組成。聚光鏡作用是會聚集光鏡的光線,,增加標本的照明,。孔徑光闌又稱光圈用來調(diào)節(jié)光線的強弱,。在孔徑光闌下面,,通常還有一個圓形的濾光片架,可根據(jù)鏡檢需要放置濾光片,。
10. 光源,。通常安裝在顯微鏡的鏡座內(nèi)提供光源。
生物顯微鏡的使用方法
1. 取用和放置。從鏡箱中取出顯微鏡時,,必須一手握持鏡臂,,一手托住鏡座,保持鏡身直立,,切不可用一只手傾斜提攜,,防止摔落目鏡。要輕取輕放,,放時使鏡臂朝向自己,,距桌子邊沿5-10厘米處。要求桌子平衡,,桌面清潔,,避免直射陽光。
2. 開啟光源,。打開電源開關,。
3. 放置玻片標本。將待鏡檢的玻片標本放置在移動臺上,,使其中材料正對聚光鏡中央,。然后用彈簧壓片夾在玻片的兩端,防止玻片標本移動,。再通過調(diào)節(jié)玻片移動器或調(diào)節(jié)移動臺,,將材料移至正對聚光鏡中央的位置。
4. 低倍物鏡觀察,。用顯微鏡觀察標本時,,應先用低倍物鏡找到物像。因為低倍物鏡觀察范圍大,,容易找到物像并定位到需作精細觀察的部位,。方法為:
1) 轉(zhuǎn)動粗準焦旋鈕,用眼從側面觀望,,使鏡筒下降,,直到低倍物鏡距標本0.5厘米左右。
2) 從目鏡中觀察,,用手慢慢轉(zhuǎn)動粗準焦旋鈕,,使鏡筒漸漸上升,直到視野內(nèi)的物像清晰為止,。此后改用細準焦旋鈕,,稍加調(diào)節(jié)焦距,使物像清晰,。
3) 微調(diào)移動臺或玻片移動器,,找到欲觀察的部分,。要注意通常顯微鏡視野中的物像為倒像,移動玻片時應向相反方向移動,。
5. 高倍倍觀察,。在低倍觀察基礎上,若想增加放大倍數(shù),,可進行高倍觀察,。方法為:
1) 將欲觀察的部分,移至低倍鏡視野正中央,,物像要清晰,。
2) 旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,使高倍物鏡移到正確的位置上,,隨后稍微調(diào)節(jié)細準焦旋鈕,,即可使物像清晰。
3) 微調(diào)移動臺或玻片移動器,,定位欲仔細觀察的部位,。
注意:使用高倍物鏡時,由于物鏡與標本之間距離很近,,因此不能動粗準焦旋鈕,,只能用細準焦旋鈕。
6. 換片,。觀察完畢,,如需換用另一玻片標片時,將物鏡轉(zhuǎn)回低倍,,取出玻片,,再換新片,稍加調(diào)焦,,即可觀察,。不允許在高倍物鏡下?lián)Q片,以防損壞鏡頭,。
顯微鏡使用注意事項
1. 顯微鏡是精密儀器,使用時必須按照操作規(guī)程,,做到細心和耐心,,切勿操之過急、動作過猛,,以防操作失誤而損壞構件 [2] ,。
2. 不要用手觸摸光學玻璃部分,同時防止劇烈碰撞而損壞構件,。
3. 觀察時一定要加蓋玻片,,不能讓玻片上的水流到移動臺上,,更不能讓酸、堿及其他化學藥品接觸顯微鏡,,不能讓顯微鏡在陽光下曝曬,。
4. 使用細準焦旋鈕時,如遇到不能繼續(xù)向同一方向轉(zhuǎn)動而到達極*,,不能蠻擰,,應向相反方向退轉(zhuǎn),并轉(zhuǎn)動粗準焦旋鈕,,然后再用細準焦旋鈕進行細調(diào),。
5. 目鏡或物鏡如有不潔時,要用專門的鏡紙作直線方向揩拭,,切勿用手指或手帕及棉布涂擦,。目鏡或物鏡如沾有油污,可先用專門的鏡紙沾少許二甲苯(或無水乙醇和Diethyl ether1∶1)擦拭干凈,,再用干凈擦鏡紙揩拭一遍,。
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