本文整理 LCMSMS和LCMS定量分析 的幾個問題，以及LCMSMS定量分析的實例供大家了解！

LCMSMS如何用內(nèi)標定量分析？

Q：本人現(xiàn)在用三重四級桿LCMSMS定量分析目標物，但是沒有標準品,。內(nèi)標法該具體怎么操作呢？資料說先配制一定重量比的待測組分和內(nèi)標樣品的混合物做色譜分析,，測量峰面積,，做重量比和面積比的關(guān)系曲線，此曲線即為標準曲線,，如果這樣的話,，沒有標準品怎么辦？

方法一：

1,、內(nèi)標法進行定量分析,，同樣需要待測物標準品。如果沒有待測物標準品就不能準確測量其含量,，因為無法繪制標準曲線,。

2、沒有待測物標準品不能準確測量其含量,，但可以通過加入內(nèi)標的方法測量待測物的相對含量,，可以比較待測物在各樣品中的多少及相差倍數(shù)。

3,、用LCMSMS做定量一般都采用MRM的掃描方式,，你沒有待測物標準品，就無法建立和優(yōu)化MRM掃描的質(zhì)譜參數(shù),，這樣你只能使用FULL SCAN或SIM的掃描方法,。沒有待測物標準品，你也無法準確得到待測物在LC上的保留時間,，如果你的樣品中有與待測物相似質(zhì)量數(shù)的化合物,，你得到的色譜峰就不會很純凈,，會對你判定那個是你的待測化合物產(chǎn)生干擾。

方法二：沒有標準品,，就只用面積相對定量,。然后選用LCMSMS的SIM模式（樣品雜質(zhì)比較少，選擇同位素豐度為100%的分子量,，上下增減0.2）,?？疾煲蛩貙е碌牧康母淖儽容^微量,，選擇一種物質(zhì)為回收率指示物（反應液前處理前加入），一種物質(zhì)為內(nèi)標物（前處理后,、液相小瓶中進樣測試前,，在待測樣品中加入定量的內(nèi)標物，然后進行測試）,。

LCMS可以進行定量分析嗎,？

Q：請問液質(zhì)聯(lián)用中質(zhì)譜跑出來用于定性的圖譜是什么樣的，既然是用質(zhì)譜來進行定量的話,，那色譜本身配置的紫外檢測器跑出來的圖譜用于何用,？液質(zhì)聯(lián)用有SIM和全掃描的，那么一般在藥物代謝動力學試驗中一般用哪一種呢,？尤其是在對體內(nèi)藥物分析時,，內(nèi)標法用于定量的質(zhì)譜圖是什么樣的？

質(zhì)譜定量分析,，使用的一般是LCMS/MS,不使用LCMS, 看一下質(zhì)荷比,，推測下分子量。UV可以用來定量,，但是在有紫外吸收的干擾峰的時候,，定量是不準的。LCMS/MS使用母離子/子離子來進行定量,，相對來說,，干擾要少的多，也比較準確,，在PK/TK的應用很廣泛,。這里只有LCMS/MS定量的譜圖，僅供參考,！

183.1/141.3 通道的是內(nèi)標,，其他的兩個是化合物。

質(zhì)譜定量中已經(jīng)被廣泛接受的方式是MS/MS定量,。這種定量常通過三級四極桿或離子阱質(zhì)譜實現(xiàn),。要求使用MS/MS的原因是：許多化合物有同樣的質(zhì)量,。當使用Di一個維度即單級質(zhì)譜MS去定量時，也會缺乏特異性,，尤其是對于像血液那樣的復雜的基質(zhì),。Di二個維度的MS（即MS/MS）在大多數(shù)情況下，能夠提供wei一的斷裂,。合并特異的母離子質(zhì)量和wei一的碎片離子信息,，可以選擇性地監(jiān)測被定量的化合物。

LCMSMS定量分析實例

我想用LC-Q-TOF-MS 來做代謝組學,，因為是樣品是體液含有多種化合物,，想加入內(nèi)標后先進行一個相對的定量來判斷含量發(fā)生變化的化合物，怎樣去定量,？用總離子流圖好像不合適,，如果利用峰面積進行相對定量的話，用哪個圖比較合適,？得用標準品才能定性嗎,？

LCMSMS定量分析使用SIM 或MRM模式。*的MRM更為準確,。SIM使用Q選擇性的濾過選中的分子量,。但是分子量相同的化合物很多，所以,，如果樣品稍微復雜的話,，SIM基本不合適。

MRM選擇母離子和子離子,。使用Q過濾母離子,，q 轟擊母離子，TOF過濾子離子,，使子離子被檢測器檢測到,。分子量相同，轟擊后產(chǎn)生的子離子不一樣的干擾離子就被排除了,。所以,，MRM模式是更為可靠的LCMS定量分析方法。MRM檢測是離子對,。

內(nèi)標的選擇原理是結(jié)構(gòu)基本和待測化合物類似,。結(jié)構(gòu)相同或類似，主要是為了滿足被離子化的效率與樣品類似,。這就是為什么很多都選擇使用該化合物或此類化合物的氘代化合物,。內(nèi)標的選擇還要求其分子量與待測物質(zhì)不重合（還需要盡量避開化合物的isotopic peak的m/z），并且可以和待測物質(zhì)分開,。

如果使用MRM, 樣品被分開的話,，那么理論上來說總離子流圖上的每個峰都是代表一種物質(zhì),。同時使用MRM模式，如果樣品們的分子量與子離子不重疊,，那么,，即使在柱子中不被分開的化合物，也是可以認為在MS中被分開了,。

液質(zhì)中幾個峰,，MRM檢測到幾十個物質(zhì)就是多個物質(zhì)在同一時間從色譜柱跑出來了。雖然出峰時間一樣,，但是每個化合物的peak應該是軟件中可以顯示出來的,，只不過報道中由于篇幅有限，會被簡略掉,。

定性的話,，需要標品,，retention time 需要一致,。

定量的話，需要先作標準曲線,。peak area ration vs concentration.