昆蟲多功能氧化酶(MFO)ELISA試劑盒依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

試劑盒規(guī)格及配置  

自備物品

①.酶標儀（450nm）

②.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL

③.37℃恒溫箱

操作步驟

①．從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

②．設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

③．樣本孔先加待測樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加,。

④．除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

⑤．棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次   （也可用洗板機洗板）。

⑥．每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。

⑦．每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果判斷

繪制標準曲線：在Excel工作表中,，以標準品濃度作橫坐標,，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線,，按曲線方程計算各樣本濃度值,。