等度洗脫和梯度洗脫的優(yōu)缺點(diǎn)

在液相色譜分離條件中，重要的參數(shù)就是洗脫條件,，其中分離條件又分為等度洗脫和梯度洗脫,。
梯度洗脫:在同一個分析周期中,，按程序不斷改變流動相的濃度配比
等度洗脫則是指從頭到尾只是用同一個流動相,。
用不用梯度洗脫,，主要看雜質(zhì)的情況。同一物質(zhì)有梯度和等度兩種條件時(shí)，選梯度較高,。雜質(zhì)與雜質(zhì),、主峰、溶劑峰的分離度要好(不好的話就要用梯度),。
(1)雜質(zhì)和主成分極性相差很大,，雜質(zhì)要全能洗脫出來(有時(shí)等度情況下從兩三個小時(shí)雜質(zhì)也沖出不來，就須考慮等度),。
(2)雜質(zhì)和主成分極性相差較大,，雜質(zhì)出峰太晚(等度沖兩個小時(shí)出來個雜質(zhì)，就可以通過梯度縮短檢樣時(shí)間)
(3)還有就是雜質(zhì)極性比主峰的大,，等度時(shí)要想主峰時(shí)間適雜質(zhì)全堆在前邊,，雜質(zhì)分開主峰又出峰太晚，這種情況也得考慮梯度洗脫,。
在色譜分析時(shí)，等度洗脫和梯度洗脫各有優(yōu)點(diǎn)和劣勢,。
等度洗脫
優(yōu)點(diǎn)
對于等度洗脫而言,，由于方法運(yùn)行時(shí)，流動相的比例不發(fā)生變化,，所以它對儀器的要求不高,，需要一個單元泵就可以運(yùn)行方法。
其次,，由于等度洗脫條件單一,，所以比較容易用來摸索方法設(shè)置，例如改變流動相比例,，改變柱溫等條件,。
并且由于等度洗脫每次運(yùn)行時(shí)的流動相比例相同，所以相同方法運(yùn)行多個樣品時(shí),，樣品之間不需要設(shè)置平衡時(shí)間來讓系統(tǒng)恢復(fù)到所需的流動相比例,。
缺點(diǎn)
但是它也有缺點(diǎn)，那就是越往后出峰的組分色譜峰越寬,。
并且大多數(shù)等度洗脫的方法分析時(shí)間較長,。

梯度洗脫
又稱為梯度淋洗或程序洗脫。
在氣相色譜中,，為了改對寬沸程樣品的分離和縮短分析周期,，一般采用程序升溫的方法。而在液相色譜中對組分復(fù)雜的樣品則采用梯度洗脫的方法,。在同一個分析周期中,，按程序不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。從而可以使一個復(fù)雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達(dá)到良好的分離目的,。

優(yōu)點(diǎn)
而梯度洗脫能夠規(guī)避掉等度洗脫的問題,，峰型得到改，很少拖尾,。例如梯度洗脫的樣品峰,，無論先出峰還是后出峰的組分，它們的峰形基本能保尖銳對稱,。
其次由于梯度洗脫通常設(shè)置的流動相比例是讓洗脫強(qiáng)度越來越強(qiáng),，這樣能保在較短的時(shí)間內(nèi)，讓樣品中強(qiáng)保留組分也能被洗脫出來,。
缺點(diǎn)
但是伴隨著這些優(yōu)點(diǎn)也會有對應(yīng)的缺點(diǎn),，先它對儀器的配置要求較高，通常需要配置四元泵或者二元泵,。
其次它在每次運(yùn)行樣品之間,，需要設(shè)置的平衡時(shí)間，來讓系統(tǒng)中流動相的比例到達(dá)初始流動相比例,。
之后,，由于它的方法設(shè)置復(fù)雜，例如影響分離的有初始流動相比例,、流動相的梯度變化,、結(jié)束流動相比例、柱溫箱溫度等,，所以方法的開發(fā)和優(yōu)化會較為復(fù)雜,。而且有時(shí)引起基線漂移。

大家可以根據(jù)自身情況判斷應(yīng)該選用什么方法