動物疫病血凝分析儀型號：DY-7000

DY-7000動物疫病血凝分析儀廣泛于動物疫病預(yù)防控制中心,、動物防疫監(jiān)督所,、獸醫(yī)藥品監(jiān)察所、獸醫(yī)研究所,、大學(xué)、疫苗生產(chǎn)和大中型飼養(yǎng)企業(yè)等單位,。 
DY-7000動物疫病血凝分析儀是根據(jù)國標中重大疫病免疫監(jiān)測方法研制的設(shè)備,，配套使用自動血凝分析管理軟件，能自動監(jiān)測常見重大動物疫病的免疫抗體效價,，及時掌握動物疫病流行規(guī)律和疫情動態(tài),，建立動物免疫效果監(jiān)測記錄檔案。系統(tǒng)當前監(jiān)測項目有：豬瘟抗體正向間接血凝檢測,、口蹄疫抗體正向間接血凝檢測,、高致病性禽流感H5亞型抗體血凝抑制檢測、高致病性禽流感H7亞型抗體血凝抑制檢測,、高致病性禽流感H9亞型抗體血凝抑制檢測,、新城疫抗體血凝抑制檢測。 

試驗方法： 
1 血凝（HA）試驗 
1） 在V型微量反應(yīng)板的1～12孔均孔加入0.025ml PBS,，換滴頭,。 
2） 吸取0.025ml血凝抗原加入孔，混勻,。 
3） 從第1孔吸取0.025ml血凝抗原加入第2孔,，混勻后吸取0.025ml加入第3孔，如此進行對倍稀釋至第11孔,，從第11孔吸取0.025ml棄去,，換滴頭。 
4） 每孔再加0.025ml PBS,。 
5） 每孔均加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液（將雞紅細胞懸液充分搖勻后加入）,。 
6） 將反應(yīng)板在振蕩器上震蕩1～2分鐘或輕扣反應(yīng)板混合反應(yīng)物，在室溫（20～25℃）下靜置40分鐘后觀察結(jié)果,，（如果環(huán)境溫度太高,，可置4℃環(huán)境下），在對照孔紅細胞顯著呈鈕扣狀時判定結(jié)果,。 
7） 結(jié)果判定  將板傾斜,，觀察紅細胞有無呈淚滴狀流淌。*血凝（不流淌）的抗原或病 釋倍數(shù)代表一個血凝單位（HAU）,。 
2  血凝抑制（HI）試驗 
1） 根據(jù)HA試驗測定的效價,，計算配制4個血凝單位(4HAU)抗原。以*血 AU抗原的稀釋倍數(shù)應(yīng)是1:64（256除以4）,。 
2） 加稀釋液： 
在微量反應(yīng)板的第1～11孔加入0.025ml PBS,，第12孔加入0.05ml PBS。 
3） 稀釋待檢血清： 
取1號待檢血清0.025ml加入排第1孔,，充分混勻后吸0.025ml于第2孔,，依次對倍稀釋至第10孔，從第10孔吸取0.025ml棄去,。 
取2號待檢血清加入第2排,；取3號待檢血清加入第3排……均按上法稀釋。 
  注意,！每取一份血清時,，必須更換吸頭。 
4） 稀釋陰性血清： 
  在血凝板的第7排孔加陰性血清0.025ml,，對倍稀釋至第3孔,，混勻后從該孔取出0.025ml棄去。 
    5） 稀釋陽性血清： 
  在血凝板的第8排第1孔加陽性血清0.025ml,，對倍稀釋至第10孔,，混勻后從該孔取出0.025ml棄去。 
6） 第1～11孔均加入含4HAU混勻的病毒抗原液0.025ml,，在室溫（20～25℃）下靜置30分鐘或2～8℃ 50分鐘,。 
7） 每孔加入0.025ml 1%（V/V）的雞紅細胞懸液，震蕩混勻,，在室溫（20～25℃）下靜置20～30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘,，對照紅細胞將呈明顯鈕扣狀沉于孔底。 
結(jié)果判定  
以*抑制4 H 倍數(shù)判為該血清的HI效價,。 
只有陰性對照孔血清滴度不大于2log2,，陽性對照血清誤差不過1個滴度，試驗結(jié)果才有效,。 
禽流感滅活疫苗的免疫效果判定：家禽免疫后21天進行免疫效果監(jiān)測,。禽流感抗體血凝抑制（HI）抗體效價≥24判定為合格 
存欄家禽抗體合格率達到≥70%判定為合格。 
新城疫免疫效果監(jiān)測：免疫21天后,，進行免疫效果監(jiān)測,。抗體血凝抑制試驗抗體效價≥25判定為合格 
存欄家禽抗體合格率達到≥70%判定為合格,。 

【注意事項】  
（1）HA和HI試驗影響因素甚多,，應(yīng)嚴格控制試驗條件。每加一試劑或樣品后需更換吸頭,，同時應(yīng)嚴格控制作用溫度和時間,。 
（2）準確配制紅細胞懸液，使用時應(yīng)隨時振搖,。 
（3）用pH值7.0～7.2的PBS作為稀釋液,。 
（4）抗原和陰、陽性血清若有污染,，應(yīng)廢棄,。 
（5）準確配制4HAU抗原,，使用前需進行滴定，滴定好的抗原應(yīng)在2小時內(nèi)用完,。 
（6）抗原和血清按規(guī)定保存,。凍干試劑應(yīng)按規(guī)定的體積用PBS溶解。溶解后2～8℃保存不過1個月,；可分裝成小包裝,，-70℃凍存，隨用隨取,。切忌反復(fù)凍融,。 
（7）鴨、鵝以及哺乳動物的血清一般需進行非特異性凝集和抑制素的處理,。 
（8）同一亞型不同毒株的HI試驗抗原,，若抗原性存在差異，則檢測同一血清的HI效價不同,。 
（9）在使用微量加樣器時,，槍頭進入試劑瓶面下約2~3ml深處，不可過深,。待槍頭撤出液面后斜貼在試劑瓶的瓶壁上,，淌走多 懸 現(xiàn)配現(xiàn)用，剩余的放于4℃保存,，如果出現(xiàn)溶血現(xiàn)象則不能使用,。 
（11）每次檢測可只做一份陰陽性血清對照試驗。 
（12）試驗完成 即上機判讀,，否則易出現(xiàn)紅細胞下滑現(xiàn)象,。 
（13）凍干對照血清和抗原存放于-20℃，溶解過后存放于4℃,。