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本說明書僅供參考,,以公司現時提供為準,,敬請來電索取。本試劑盒只能用于科學研究,,不得用于醫(yī)學診斷,。
小鼠組織多肽抗原(TPA)定量檢測試劑盒(ELISA)
使用說明書
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒試劑盒名稱】
小鼠組織多肽抗原(TPA)定量檢測試劑盒(ELISA)
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒試劑盒用途】
定量檢測血清、血漿及相關液體,。
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒檢測原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),。將標準品、待測樣本加入到預先包被小鼠組織多肽抗原(TPA)單克隆抗體透明酶標包被板中,,溫育足夠時間后,,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,,溫育足夠時間后,,洗滌除去未結合的成分,。依次加入底物A、B,,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中小鼠組織多肽抗原(TPA)濃度呈正相關,,450nm波長下測定OD值,,根據標準品和樣品的OD值,計算樣本中小鼠組織多肽抗原(TPA)含量,。
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒試劑盒組成】
1 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 7 | 顯色劑A液 | 6mL |
2 | 標準品 | 0.3mL×6管 | 8 | 顯色劑B液 | 6mL |
3 | 20倍濃縮洗滌液 | 25mL | 9 | 終止液 | 6mL |
4 | 樣本稀釋液 | 6mL | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 特殊稀釋液 | 6mL | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 酶標試劑 | 6mL | 12 | 密封袋 | 1個 |
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
1,、37℃恒溫箱
2、標準規(guī)格酶標儀
3,、精密移液器及一次性吸頭
4,、蒸餾水
5、一次性試管
6,、吸水紙
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒操作步驟】
1,、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘,。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3,、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,,固定于框架上,分別設置標準品孔,、待測樣本孔和空白對照孔,,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL,;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加,。
4,、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5,、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板),。
6,、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加,。
7,、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
8,、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板),。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min,。
10,、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
11,、測定:以空白孔調零,,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值),。
12,、計算:根據標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,,再根據樣本的OD值,,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數,。
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),,因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑,。
2、標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融,。
3、樣本應充分離心,,不得有溶血及顆粒,。
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒注意事項】
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,。
2、酶標包被板開封后如未用完,,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。
3、建議所有的標準品,、樣本和空白對照都做雙份檢測,,取平均值,以減小實驗誤差,。
4,、牢記樣本已經稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度,。
5,、本試劑盒定量范圍為6.25-200ng/L,超過此范圍,,為標準曲線延伸計算所得,,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(6.25-200ng/L范圍內),,乘以總稀釋倍數即為樣本zui終濃度,。
6、若顯色過淺,,可適當延長底物溫育時間,。
7、為避免交叉污染,,標準品,、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液,、樣本稀釋液和底物等公共組分,,要懸臂加樣,不得碰到微孔,;不得重復使用封板膜,。
8,、試劑盒保質期內使用,不同批號的試劑不得混用,。
9,、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒操作程序總結】
準備試劑,,樣品和標準品
計算
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒檢測范圍】
請
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒規(guī)格】
96人份/盒 48人份/盒
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒貯藏】
2-8℃,避光防潮保存,。
【小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒有效期】
6個月
本公司為國內試劑盒供應商之一,,質量保證。
公司主頁:www.shjlsw.com,、
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