大腸桿菌O157抗原檢測試劑盒（膠體金法）

廣州健侖生物科技有限公司

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1,、原理及適用范圍 
腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現(xiàn)的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉,、出血性腸炎外,，還可發(fā)生溶血性尿毒綜合癥,、血栓性血小板減少性紫癜等嚴(yán)重的并發(fā)癥。自1982年美國發(fā)現(xiàn)因該致病菌引起的食物中毒以來,，腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴(kuò)散和蔓延,，相繼在英國、加拿大,、日本等多個國家引起腹瀉爆發(fā)和流行,。我國已陸續(xù)有十余個省份在市售食品、進(jìn)口食品,、腹瀉病患者,、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。大腸桿菌O157測試片(Filmplate^TM E.coli O157BO204)采用進(jìn)口高選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料,，運用微生物測試片專有技術(shù),，做成一次性快速檢驗產(chǎn)品，一步培養(yǎng)15～24h就可確認(rèn),，大大地簡化了檢測程序,，非常適合各級檢驗部門和食品企業(yè)使用。本品適用于海產(chǎn)品,、水產(chǎn)品,、各類熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測,。參照標(biāo)準(zhǔn)：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗(GB/T4789.36-2008),。 

2、操作方法 
2.1,、樣品處理：取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),，制成1:10的樣品勻液,。 
2.2、接種：將大腸桿菌O157測試片置于平坦實驗臺面,，揭開上層膜,，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下,，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,，后用手輕輕地壓一下，每個稀釋度接種兩片,，同時做一片空白陰性對照,。 
2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中,，并封口,，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片,。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,，培養(yǎng)15～24h。

3,、結(jié)果判讀 
對測試片進(jìn)行觀察,，呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157；呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群,。出現(xiàn)陽性菌落的樣本,，建議用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗一次,。

4,、報告方式 
報告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。 

5,、附加說明 
5.1,、本品所用培養(yǎng)基已在國外得到比較廣泛的應(yīng)用，有關(guān)驗證試驗表明,，接純菌種可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,，準(zhǔn)確率達(dá)到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85：425-428)。 
5.2,、經(jīng)本公司檢測,，大腸桿菌O157測試片對純菌的檢測靈敏度為1CFU/mL。 
5.3,、注意使用過的測試片上帶有活菌,，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。 

6,、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中,，保質(zhì)期為一年,，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中,，一個月內(nèi)用完,。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,，建議在拆封前將整包回溫至室溫,。