動物細胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境，pH約為7.2~7.4,，以不超出6.8~7.6范圍為宜,。緩沖系統(tǒng)對于維持培養(yǎng)基的pH是至關(guān)重要的，動物培養(yǎng)基的pH是通過模擬血漿中天然存在的

    CO2/NaHCO3（實際是CO32-/HCO3-）系統(tǒng)來控制的,。配置動物培養(yǎng)基時,，會將NaHCO3作為等滲溶液的一部分添加到培養(yǎng)基。

     一方面,，由于NaHCO3不穩(wěn)定,，易分解產(chǎn)CO2,，CO2從培養(yǎng)液中游離到空氣中，會使培養(yǎng)液pH升高,；另一方面,，細胞呼吸產(chǎn)生的CO2以及代謝產(chǎn)生的酸性代謝產(chǎn)物，又使pH降低,。

       在培養(yǎng)開始的一段時間,，細胞較少，呼吸產(chǎn)生的CO2較少,，前者作用大于后者,，培養(yǎng)液中pH可能會明顯上升，這就需要培養(yǎng)箱中補充一定量的CO2來維持pH,；而后期隨著細胞數(shù)目增多,，細胞產(chǎn)生CO2增加，后者作用便大于前者,，此時,，培養(yǎng)基中pH可能會明顯降低，盡管大多動物細胞耐酸能力比耐堿能力略強一些,，但如果超過警戒值,，則需要更換培養(yǎng)基進行傳代,。

     培養(yǎng)液中一般加入酚紅作為pH指示劑,，所以此培養(yǎng)基中顏色變化是：櫻桃紅色→粉紅色→黃色。如果使用培養(yǎng)基之前,，先通入CO2,，或在CO2培養(yǎng)箱內(nèi)進行開放式培養(yǎng)，則培養(yǎng)基顏色變化是：櫻桃紅色→黃色,。如果培養(yǎng)基變黃,，則需要及時更換培養(yǎng)基。

    培養(yǎng)箱中CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中NaHCO3濃度相平衡,，如果培養(yǎng)箱中CO2濃度設(shè)定在5%,，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量應(yīng)為1.97 g/L；如果CO2濃度維持在10%,，則NaHCO3的加入量應(yīng)為3.95 g/L,。

     動物細胞對pH變化比較敏感，但植物細胞就沒那么嬌弱了,，培養(yǎng)過程中pH的變化幅度只要別太大,，對它并不會造成明顯損傷。