硫酸小諾霉素（測試物質：小諾霉素）

硫酸小諾霉素

Liusuan Xiaonuomeisu Micronomicin Sulfate

本品為0-2-氨基-2,，3,，4,，6-四脫氧-6-甲氨基-α-D-赤-己吡喃糖基-(1→4)-O-[3-脫氧-4-C-甲基-3-甲氨基-β-L-阿吡喃糖基-(1→6)]-2-脫氧-D-鏈霉胺硫酸鹽。按無水物計算,，每1mg 的效價不得少于590小諾霉素單位,。

【性狀】本品為白色或類白色的疏松固體或粉末；無臭,， 有引濕性,。

本品在水中易溶，在甲醇,、乙醇,、丙酮或乙酸乙酯中幾乎不溶。

比旋度  取本品,，精密稱定,，加水溶解并定量稀釋制成每 1ml中約含10mg的溶液，依法測定,，比旋度為 + 110°至+ 130°,。

【鑒別】（1)取本品約5mg，加水溶解后,，加0.1%茚三酮 的水飽和正丁醇溶液1ml與吡啶0.5ml,，在水浴中加熱5分鐘，即顯紫藍色,。

（2）取本品與小諾霉素標準品適量,，分別加水制成每 1ml中各約含5mg的溶液，作為供試品溶液與標準品溶液,，照薄層色譜法（通則0502)試驗,，吸取上述兩種溶液各 5μl,分別點于同一硅膠G薄層板上。另取三氯甲烷-甲醇- 氨水（4:3:2)混合振搖,，冷藏12小時,，取下層混合液為展開劑，用適宜容器裝60%硫酸溶液調節(jié)濕度,，展開,，取 出，于20?25℃晾干,，置碘蒸氣中顯色,，供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應與標準品溶液所顯主斑點的位置和顏色相同。

（3）取本品和小諾霉素標準品適量,，分別加水溶解并稀釋制成每1ml中約含小諾霉素0. 5mg的溶液,，作為供試品溶液與標準品溶液,，照小諾霉素組分項下的色譜條件試驗,，供試品溶液主峰的保留時間應與標準品溶液主峰的保留時間一致。

（4）本品的水溶液顯硫酸鹽的鑒別反應。

以上（2),、（3)兩項可選做一項,。

【檢查】酸度取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液,，依法測定,pH值應為4.0?6.5,。

溶液的澄清度與顏色取本品5份，各l.0g,，分別加水 l0ml溶解后,，溶液應澄清無色；如顯渾濁,，與1號濁度標準液比較,，均不得更濃；如顯色,，與黃色或 黃綠色2號標準比色液比較,，均不得更深（供注射用）。

硫酸鹽  取本品約0.125g,，精密稱定,，加水100ml使溶解，用濃氨溶液調節(jié)pH值至11,，精密加氯化鋇滴定液 (0.lmol/L)10ml及酞紫指示液5滴,，用乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05mol/L)滴定，注意保持滴定過程中的pH值為11,， 滴定至紫色開始消褪,，加乙醇50ml，繼續(xù)滴定至紫藍色消失,， 并將滴定的結果用空白試驗校正,。每1ml氯化鋇滴定液 (0. 1mol/L)相當于9, 606mg硫酸鹽（S0₄)，按無水物計算,，含硫酸鹽應為32.0%?37.0%,。

水分  取本品，照水分測定法測定,， 含水分不得過12.0%,。

小諾霉素組分  照液相色譜法測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（pH值范圍為0.8?8.0),；以0.2mol/L三 氟醋酸-甲醇（94 : 6)為流動相,；流速為每分鐘0.6ml;蒸發(fā)光散射檢測器檢測(漂移管溫度：75度，氣體流速3l/min,，氣體壓力：3.8bar),，分別稱取慶大霉素C_la對照品與小 諾霉素標準品適量,，加水溶解并稀釋制成每1ml中各約含0.2mg的溶液，量取20μl注人液相色譜儀,，記錄色譜圖,，慶大霉素C_la峰和小諾霉素峰的分離度應符合要求。

ELSD9000 蒸發(fā)光散射檢測器

測定法  取小諾霉素標準品適量,，精密稱定,，分別加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含小諾霉素0. 2mg、0. 5mg和1.0mg的溶液,，作為標準品溶液（1),、（2)、（3),。精密量取上述三種溶液各分別20μl,，注入液相色譜儀，記錄色譜圖,，以標準品溶液濃度的對數(shù)值與相應峰面積的對數(shù)值計算線性固歸方程,，相關系數(shù)（r)應不小于0. 99;另取本品適量，精密稱定,，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含小諾霉素0.5mg的溶液,，作為供試品溶液，同法測定,，用線性回歸方程計算供試品中C₂₀H₄₁N₅O₇ 的含量,，換算成 C₂₀H₄₁N₅O₇• 2 H₂SO,的含量，按無水物計算,，應不低于85.0%,。（C₂₀H₄₁N₅O₇• 2 H₂S04 : C₂₀H₄₁N₅O₇為1 : 0.6540)。

熾灼殘渣  不得過0.5%,。

細菌內毒素  取本品,，依法檢查（通則1143)，每1mg小 諾霉素中含內毒素的量應小于0.50EU,。（供注射用）

【含量測定】精密稱取本品適量,，加滅菌水定量制成每 1ml中約含1000單位的溶液，照抗生素微生物檢定法（通則 1201)測定,?？尚畔蘼什坏么笥?%。1000小諾霉素單位相 當于1mg小諾霉素,。

【類別】氨基糖苷類抗生素,。

【貯藏】密封，干燥處保存,。

【制劑】（1)硫酸小諾霉素口服溶液（2)硫酸小諾霉素片（3)硫酸小諾霉素注射液