這個(gè)問題由上海恒遠(yuǎn)來幫您解決.一直以來,，我司小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒以其敏感性高,、特異性強(qiáng),、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn),，在科研中深受廣大,，科研工作者的喜愛,。

小鼠免疫球蛋白試劑盒檢測原理:
小鼠免疫球蛋白試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往預(yù)先包被對稱性免疫球蛋白A(IgA)抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的對稱性免疫球蛋白A(IgA)試劑盒呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD值）,，計(jì)算樣品濃度。

小鼠免疫球蛋白試劑盒樣品收集,、處理及保存方法:
1,、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2,、血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
3,、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,。
4,、取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測,。

小鼠免疫球蛋白試劑盒操作:
小鼠免疫球蛋白試劑盒使用前,，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí),。甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,，洗滌次數(shù)增加一次,。每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。取出酶標(biāo)板,，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。在450nm波長處測定各孔的OD值,。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果,。

小鼠免疫球蛋白試劑盒：
1,、靈敏度：小的檢測濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為1.0 nmol/L,。
2、特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng),。
3,、重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

文章關(guān)鍵詞：小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒,試劑盒操作方法,操作注意事項(xiàng)