液相色譜用溶劑分為流動(dòng)相用溶劑和空白溶劑,。選擇的溶劑一般應(yīng)具有低粘度,、高純度,、化學(xué)穩(wěn)定性好對(duì)樣品有合適的極性和良好的選擇性,、與檢測(cè)器兼容性強(qiáng),、低毒等特征,。

流動(dòng)相溶劑的選擇沒有一定的模式，更多的來源于經(jīng)驗(yàn)的積累,，但溶劑的極性和理化性質(zhì)可以作為重要的選擇依據(jù),。流動(dòng)相所用溶劑一般為二元或多元溶劑，以便于靈活調(diào)節(jié)流動(dòng)相的極性和增加選擇性,，以改進(jìn)分離和調(diào)整出峰時(shí)間,。選擇溶解樣品的空白溶劑時(shí)一般要綜合考慮到樣品的極性和溶解度、溶劑的洗脫強(qiáng)度和組成,、進(jìn)樣量等因素進(jìn)而選擇合適的溶劑,，為了選擇的簡便性的同時(shí)避免溶劑效應(yīng)的產(chǎn)生，一般選擇同流動(dòng)相所選溶劑一致或相似,。

低粘度

粘度過高會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散增大柱壓,、降低柱效，延長分離時(shí)間，不利于色譜峰的分離,。但粘度過于低的溶劑也不宜采用,，例戊烷、yi醚等,，它們易在色譜柱或檢測(cè)器內(nèi)形成氣泡,，影響泵的工作，不利于色譜柱的分離效果,。同時(shí)色譜峰的塔板數(shù)與流動(dòng)相溶劑的粘度成反比,，粘度越大理論塔板數(shù)越低。而粘度與沸點(diǎn)密切相關(guān),，通常選用沸點(diǎn)高于柱溫20～50℃但低于100℃,，粘度不大于5×10^-4Pa.S的溶劑作為液相色譜用溶劑。

高純度

由于液相靈敏度高,，對(duì)溶劑的純度也要求高,。不純的溶劑會(huì)引起基線不穩(wěn)，或產(chǎn)生“偽峰”,。痕量雜質(zhì)的存在,，即可使截止波長值大幅增加。同時(shí)色譜柱的壽命與溶劑純度也有關(guān),，當(dāng)含有大量雜質(zhì)的溶劑流過色譜柱,，雜質(zhì)富集在色譜上極易造成色譜柱的堵塞。液相所用溶劑應(yīng)盡量達(dá)到HPLC級(jí),，理論上*由HPLC級(jí)溶劑組成的流動(dòng)相不需要過濾,，但考慮到溶劑中溶解有氣體，在洗脫過程中當(dāng)流動(dòng)相由色譜柱流至檢測(cè)器時(shí),，因壓力降低產(chǎn)生氣泡,，若富集于檢測(cè)池中會(huì)增大基線噪音，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成分析靈敏度下降,。溶劑中溶解的氧氣也會(huì)導(dǎo)致某些組分或色譜柱的固定相發(fā)生降解而改變柱的分離性能,。同時(shí)溶劑在存儲(chǔ)分裝過程中會(huì)引入部分雜質(zhì)，建議即使是HPLC級(jí)的溶劑亦需要進(jìn)行過濾處理,。

具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,，對(duì)樣品有合適的極性和良好的選擇性

溶劑不能與樣品發(fā)生反應(yīng)或聚合，一般的選擇原則為相似相容原則即極性大的試樣用極性強(qiáng)的洗脫劑,，極性弱的試樣用極性弱的洗脫劑,。所選溶劑亦不得改變色譜柱填料的任何性質(zhì)。如低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料遇到部分有機(jī)溶劑會(huì)溶脹或收縮,，改變色譜柱的性質(zhì),。正相色譜分配中流動(dòng)相的極性小于固定相的極性以利于極性化合物的分離,；反向分配色譜中流動(dòng)相的極性大于固定相的極性以利于非極性化合物的分離。對(duì)樣品的溶解度要適宜,，如果溶解度欠佳,，樣品可能會(huì)在柱頭析出富集，不但會(huì)影響色譜峰的分離,，也會(huì)損壞色譜柱,，堵塞儀器管路。在一般的色譜分析中我們用到的溶劑多為二元溶劑或多元溶劑,，溶劑的極性是通過混合溶劑的比例進(jìn)行調(diào)節(jié)的,，改變?nèi)軇┑臉O性，增加溶劑的選擇性,，進(jìn)而改善分離和出峰時(shí)間,。當(dāng)樣品用非流動(dòng)相溶解時(shí)，如果樣品的洗脫強(qiáng)度比流動(dòng)相弱,，可適當(dāng)加大進(jìn)樣體積，一般對(duì)峰寬和分離度無不良影響,。但有時(shí)為了完成樣品的溶解性,，會(huì)用強(qiáng)洗脫能力的溶劑溶解樣品，樣品溶劑可看為流動(dòng)相的一部分,，溶解在其中的樣品在其帶動(dòng)下在色譜柱快速遷移,，而部分樣品同時(shí)會(huì)溶解在流動(dòng)相中，產(chǎn)生溶劑效應(yīng),，使峰變寬分叉,，部分析出的樣品會(huì)堵塞色譜柱和儀器管路，造成分析方法準(zhǔn)確度下降,。在選用強(qiáng)洗脫能力的溶劑溶解樣品時(shí)要適當(dāng)降低進(jìn)樣量,，以避免溶劑效應(yīng)的產(chǎn)生。我們選擇樣品溶劑的一般原則為實(shí)驗(yàn)要求的流動(dòng)相,，如流動(dòng)相中含有大量的鹽,，一般會(huì)選擇有機(jī)相比例小于等于去除緩沖鹽的起始流動(dòng)相體系。

與檢測(cè)器匹配

對(duì)于紫外檢測(cè)器,，需要考慮溶劑在紫外波段的吸收,，所用的溶劑的截止波長應(yīng)小于檢測(cè)波長，保證在所選擇的檢測(cè)波長下,，溶劑無吸收或者吸收較小,。對(duì)于示差檢測(cè)器，需要考慮溶劑的折射率,，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動(dòng)相,，以達(dá)高靈敏度。

附常用溶劑性質(zhì)