30％磷酸水溶液通過酸反應(yīng)和強(qiáng)表面活性劑／洗滌劑的共同作用，可以有效地清潔不銹鋼及其它潤濕的部件,。這一方法比更常用的硝酸“鈍化”更有效,、且較少損害特別是對(duì)日常使用低紫外波長(zhǎng)的應(yīng)用來說。這一磷酸清洗步驟不是起鈍化作用,，但它是系統(tǒng)鈍化前清洗的*步,。
     一般來說，對(duì)于陽離子的離子色譜分析或配有氧化方式的電化學(xué)檢測(cè)器以外的應(yīng)用不需要鈍化系統(tǒng),。因?yàn)橛姓婵彰摎鈾C(jī)每個(gè)通道體積為8m1，可不*磷酸,；中洗全部通道,。如果你計(jì)劃四個(gè)通道都要用，則可用濕灌注的方式以4mL／min流速對(duì)每個(gè)通道清洗8～1 O分鐘來清洗脫氣機(jī),。這一步完成后你必須*淋洗管路,，用水淋洗2～3次以便將磷酸從溶劑過濾頭等部件沖洗凈,。
     安裝好的HPLC系統(tǒng)的酸清洗和鈍化
     HPLC系統(tǒng)內(nèi)部可能的污染物來自人的觸摸，暴露在實(shí)驗(yàn)室化學(xué)環(huán)境,，與零部件制造相關(guān)的殘留物,，或來自先前的流動(dòng)相和樣品的殘余物。
     雖然系統(tǒng)自身也會(huì)逐步地被流動(dòng)相清洗,，但某些釋放出的雜質(zhì)會(huì)吸附在色譜柱上以及檢測(cè)器潤濕的表面上,，因而會(huì)降低總的性能。
     磷酸清洗：
     通常用于從系統(tǒng)中除去有機(jī)雜質(zhì),?？赡苁怯捎谙礈熳饔茫坪醣葟?qiáng)有機(jī)溶劑更好也更快,。這一步清洗必須在硝酸鈍化之前完成,。
     硝酸鈍化：
     實(shí)際上是作用于不銹鋼表面，在表面上生成均勻的氧化層,。這層氧化膜保護(hù)不銹鋼免受腐蝕鹵化物,，螯合劑，等等并且盡量減少浸出的金屬離子進(jìn)入流動(dòng)相,。
     以下應(yīng)用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸鈍化,，包括：
     ①所有的氨基酸分析系統(tǒng)；
     ②所有包含電化學(xué)檢測(cè)器的系統(tǒng),；
     ③所有要分析無機(jī)陽離子,，包括過渡金屬的系統(tǒng)；
     ④所有利用柱后添加衍生試劑或絡(luò)合樣品組分的系統(tǒng),。
    
     以下應(yīng)用需要在使用前只做磷酸清洗,，包括：
     ①所有常規(guī)用途的、可能在低pH環(huán)境下在低紫外檢測(cè)波長(zhǎng)下運(yùn)行的HPLC系統(tǒng),；
     ②所有需要高靈敏度性能的梯度紫外檢測(cè)系統(tǒng),。
     系統(tǒng)清洗指南：
     注意：在實(shí)行這個(gè)程序時(shí)采用適當(dāng)?shù)陌踩雷o(hù)措施準(zhǔn)備工作：
     首先，摘下色譜柱,，用兩通或接頭取代色譜柱,。在實(shí)行這一清洗步驟時(shí)，如果有可能選擇監(jiān)測(cè)的紫外波長(zhǎng)為：254nm,。通過軟件或移去電纜的方式取消紫外檢測(cè)器的自動(dòng)回零功能,。
     具體步驟：
     1、用甲醇*沖洗系統(tǒng),，以等比例方式通過泵的所有管路,。
     2、用水*沖洗系統(tǒng),，以等比例方式通過泵的所有管路,。
     3,、以等比例方式通過泵的所有管路導(dǎo)入～30％v／v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大約一個(gè)小時(shí),。在沖洗期間活動(dòng)所有的閥,，包括：參比閥、進(jìn)樣閥及旁路閥等等,。
     4．用水*沖洗所有管路和系統(tǒng),。
     必要時(shí)用6N硝酸HN03重復(fù)以上步驟。否則,，跳到第7步,。注意：硝酸是一個(gè)強(qiáng)紫外吸收溶液。除非需要,，不要做鈍化程序,。
     5．以等比例方式通過泵的所有管路導(dǎo)人6N硝酸水溶液大約是40％。以1mL/min流速洗大約一個(gè)小時(shí),。
     6．用水*沖洗系統(tǒng),，仔細(xì)檢查是否有任何滲漏，在沖洗期間反復(fù)活動(dòng)所有的閥,，包括：參比閥,、進(jìn)樣閥及旁路閥等等。
     注意：如果你要用低于270nm的紫外波長(zhǎng)作檢測(cè),，則需要更大量水的清洗過程,，不斷的換新鮮水并活動(dòng)各個(gè)閥沖洗進(jìn)樣器，等以便從系統(tǒng)中除去所有的痕量硝酸根離子,。硝酸清洗后經(jīng)常在幾天之內(nèi)都會(huì)觀察到在低紫外波長(zhǎng)下有負(fù)的基線漂移,。勤換水和有耐心是盡快消除紫外本底的關(guān)鍵。
     7．返回到甲醇洗,，然后繼續(xù)用實(shí)驗(yàn)所需的溶劑沖洗,。
     8．通過軟件或接上電纜的方式重新使紫外檢測(cè)器的自動(dòng)回零功能恢復(fù).