熒光顯微鏡是細(xì)胞生物學(xué)的基本工具。它是由光源,、濾色片和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成,。是利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大觀察標(biāo)本的熒光圖像而實現(xiàn)對熒光樣品的定性定量研究,。

激發(fā),、濾光、成像,、淬滅,，熒光實驗的調(diào)整就是怎么才能協(xié)調(diào)好以上因素得到理想的效果，一個常被忽視的方面是光源的使用,，熒光顯微鏡的常用光源都是白光光源：高壓汞燈和氙燈,，現(xiàn)在還新出了金屬鹵素?zé)艉蚅ED。

1,、汞燈

超高壓汞燈（50-200W）,，它是用石英玻璃制作，中間呈球形,，內(nèi)充一定數(shù)量的汞,，工作時由兩個電極間放電，引起水銀蒸發(fā),，球內(nèi)氣壓迅速升高,，當(dāng)水銀*蒸發(fā)時，可達(dá)50～70個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力,，這一過程一般約需5～15min,。超高壓汞燈的發(fā)光是電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。它發(fā)射很強的紫外和藍(lán)紫光,，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì),，因此，為熒光顯微鏡普遍采用,。

推薦產(chǎn)品：歐司朗50W,，103W，200W汞燈,，適用于各大廠家熒光顯微鏡,；一般200小時壽命,，長400小時。

2,、氙燈

氙燈和汞燈做為白光源,，都能提供從紫外到近紅外一系列波長的光，但它們卻有著不同的激發(fā)光譜,。汞燈集中在近紫外,、藍(lán)光以及綠光附近，這種在峰值的高激發(fā)能量確保產(chǎn)生明亮的熒光信號,，但光毒性卻很強,。因此，HBO用來對固定樣品或弱熒光成像,。相比而言,，氙燈光源的激發(fā)比較平緩，可以用于不同波長間強度的比較,，例如用于鈣離子濃度測量等,。氙燈的強激發(fā)在近紅外800-1000nm。

XBO較HBO的特點：

1）光譜強度更均勻

2）在紅外及中紅外仍有較強光譜強度

3）能量較強更易到達(dá)物鏡后孔徑

推薦產(chǎn)品：XBO75W,，100W氙燈,；壽命一般400小時，1200小時

3,、金屬鹵素?zé)?/span>

這是近年來出現(xiàn)的一種光源,，它和汞燈的激發(fā)光譜很像，但它和顯微鏡以光纖相連,，能散熱,，壽命更長。光纖從光源連到顯微鏡上,，可以大量減少光產(chǎn)生的熱能,。金屬鹵素?zé)魧罴?xì)胞成像的另一個優(yōu)勢是內(nèi)置強度設(shè)計裝置，可以容易調(diào)節(jié)激發(fā)光,。

推薦產(chǎn)品：EXPO公司X-cite光源,，120W，適用于各大廠家熒光顯微鏡,；壽命2500小時以上,。

4、近來,，還出現(xiàn)了一種新的熒光光源：LED,，這種光源的開關(guān)在毫秒間，減少樣品在光照下的暴露時間,，延長壽命,。另外,，LED光的衰減即快又，長期活細(xì)胞試驗下可大大減少光毒性,。和白光相比，LED僅僅在一個較窄的光譜激發(fā),，多個LED波段使得LED光源能為多色熒光提供應(yīng)用,。