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液相色譜的眼睛——檢測器

來源:天津市蘭博實驗儀器設(shè)備有限公司   2019年03月25日 17:22  

    液相色譜系統(tǒng)是由液體輸送系統(tǒng)-泵,、進樣器,、色譜分離柱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)幾部分組成,。檢測器是液相色譜系統(tǒng)的眼睛,,它將樣品的物理或化學(xué)特性信息轉(zhuǎn)換成易測量的電信號輸入到記錄儀,并記錄下來,,得到樣品組分分離的色譜圖,。


    通常將檢測器分為通用型和選擇型2種,通用型檢測器是指可連續(xù)測量色譜柱流出物(包括流動相和樣品組分)的全部特性變化,,如示差折光檢測器,、蒸發(fā)光散射檢測器等;而選擇型檢測器是用以測量被分離樣品組分某種特性的變化,,這類檢測器對樣品中組分的某種物理或化學(xué)性質(zhì)敏感,,而這一性質(zhì)是流動相所不具備的,或至少在操作條件下不顯示,,如紫外檢測器,、光電二極管陣列檢測器、熒光檢測器等,。

檢測器分類

檢測原理

特點

缺點

紫外-可見 光(UV-VIS)檢測器

基于Lambert-Beer定律,,即被測組分對紫外光或可見光具有吸收,且吸收強度與組分濃度成正比,。

很多有機分子都具紫外或可見光吸收基團,,有較強的紫外或可見光吸收能力,因此UV-VIS檢測器既有較高的靈敏度,,也有很廣泛的應(yīng)用范圍,。由于UV-VIS對環(huán)境溫度、流速,、流動相組成等的變化不是很敏感,,所以還能用于梯度淋洗。

1.對沒有紫外/可見波長吸收的樣品無法檢測2.流動相的選擇受到流動相組分對紫外可見光的吸收影響,現(xiàn)有紫外可見檢測器在常用的流動相下當波長低于210nm時檢測效果較差,; 3.不同物質(zhì)在同一檢 測波長下的響應(yīng)因子不相同

二極管陣列檢測 器(diode-array detector , DAD

以光電二極管陣列(或CCD陣列,,硅靶攝像管等)作為檢測元件的UV-VIS檢測器。它可構(gòu)成多通道并行工作,,同時檢測由光柵分光,,再入射到陣列式接受器上的全部波長的信號,然后,,對二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù),,得到的是時 間、光強度和波長的三維譜圖,。與普通UV-VIS檢測器不同的是,,普通UV-VIS檢測器是先用單色器分光,只讓特定波長的光進入流動池,。而二極管陣列UV-VIS檢測器是先讓所有波長的光都通過流動池,,然后通過一系列分光技術(shù),使所有波長的光在接受器上被檢

特點與紫外檢測器相同,,同時可動態(tài)的在同一時間檢測所有波長下的吸收,。

1.與紫外可見家測起相

2.靈敏度和重現(xiàn)性低 于紫外檢測器。

示差折光檢測 器(differential refractometers, RI)

原理:基于樣品組分的折射率與流動相溶劑折射率有差異,,當組分洗脫出來時,,會引起流動相折射率的變化,這種變化與樣品組分的濃度成正比,。 RI 檢測器根據(jù)其設(shè)計原理可分為反射型(根據(jù)Fresnel定律),、折射型(根據(jù)Snell定律)和干涉型三種類型。

示差折光檢測法也稱折射指數(shù)檢測法,。絕大多數(shù)物質(zhì)的折射率與流動相都有差異,,所以RI是一種通用的檢測方法。雖然其靈敏度比其他檢測方法相比要低1-3個數(shù)量級,。對于那些無紫外吸收的有機物(如高分子化合物,、糖類、脂肪烷烴)是比較適合的,。在凝膠色譜中是*檢測器,,在制備色譜中也經(jīng)常使用。

1.靈敏度很低

2.不能用于梯度洗脫系統(tǒng)

蒸發(fā)光散射檢測 器(evaporative light-scattering detector, ELSD)

ELSD是基于溶質(zhì)的光散射性質(zhì)的檢測器,。由霧化器,、加熱漂移管(溶劑蒸發(fā)室),、激光光源和光檢測器(光電轉(zhuǎn)換器)等部件構(gòu)成,。色譜柱流出液導(dǎo)入霧化器,被載氣(壓縮空氣或氮氣)霧化成微細液滴,,液滴通過加熱漂移管時,,流動相中的溶劑被蒸發(fā)掉,,只留下溶質(zhì),激光束照在溶質(zhì)顆粒上產(chǎn)生光散射,,光收集器收集散射光并通過光電倍增管轉(zhuǎn)變成電信號,。

因為散射光強只與溶質(zhì)顆粒大小和數(shù)量有關(guān),而與溶質(zhì)本身的物理和化學(xué)性質(zhì)無關(guān),,所以ELSD屬通用型和質(zhì)量型檢測器,。適合于無紫外吸收、無電活性和不發(fā)熒光的樣品的檢測,。其靈敏度與載氣流速,、汽化室溫度和激光光源強度等參數(shù)有關(guān)。與示差折光檢測器相比,,它的基線漂移不受溫度影響,,信噪比高,也可用于梯度洗脫,。檢測任何不揮發(fā)樣品,,提供的樣品組份和幾乎相同的響應(yīng)因子,靈敏度高于RI,、低波長紫外檢測器和其他ELSD,,不需要日常維護,可和HPLC,、GPC和SFC連用

流動相相不能含有不揮發(fā)組分(可使用有機酸堿替代)

熒光檢測 器(fluorescence detector)

許多有機化合物,,特別是芳香族化合物、生化物質(zhì),,如有機胺,、維生素、激素,、酶等,,被一定強度和波長的紫外光照射后,發(fā)射出較激發(fā)光波長要長的熒光,。熒光強度與激發(fā)光強度,、量子效率和樣品濃度成正比。有的有機化合物雖然本身不產(chǎn)生熒光,,但可以與發(fā)熒光物質(zhì)反應(yīng)衍生化后檢測,。 結(jié)構(gòu)

有非常高的靈敏度和良好的選擇性,靈敏度要比紫外檢測法高2-3個數(shù)量級,。而且所需樣品量很小,,特別適合于藥物和生物化學(xué)樣品的分析。

1.樣品的選擇性較強

2.其它與紫外檢測器相似

    天津蘭博提供示差折光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器,、紫外檢測器,、光電二極管陣列檢測器、熒光檢測器等各種類型檢測器,。

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