人ELISA試劑盒包被在固相上的抗原純度大大提高,，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法試驗(yàn)的特異性,、敏感性均由此得以改善,，重復(fù)性亦佳,。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100,。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用,。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí),，需用DNA作為包被抗原,，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。

方法一 用于檢測(cè)未知抗體的間接法： 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml,， 每孔加0.1ml,，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次,。人ELISA試劑盒加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被的反應(yīng)孔中置37℃孵育1小時(shí)洗滌,。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
于反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌,。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱(chēng)為包被,。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程,。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的,，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用。這種物理吸附是非特異性的,，受蛋白質(zhì)的分子量,、等電點(diǎn)、人ELISA試劑盒濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的,，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),，因此更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法,。