Ramos 人Burkitt's淋巴瘤細胞

Catalogue No.: C446

Product Format: frozen

Culture Properties：懸浮

Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application:  Cells and cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Components  

Operation steps for cell culture

• 輕輕吹勻細胞,，收集懸液1000rpm(150g左右)離心3min,，棄上清；
• 用新的*培養(yǎng)基重懸細胞,，均勻分為幾份,，接種到新的培養(yǎng)瓶中，并補加足量的*培養(yǎng)基,；

（懸浮細胞比較依賴細胞密度,，細胞傳代前及傳代后密度不宜過低，過低可能會導致細胞生長緩慢或者死亡,。細胞傳代前培養(yǎng)基不能*變黃,，不然細胞狀態(tài)變差會導致傳代失敗。傳代過程吹打細胞應盡量輕柔,，不應吹出過多氣泡,。）

• 將細胞放回37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代,，生長較慢的細胞可以1:2傳代,。

Cell cryopreservation

• 凍存液：92%*培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實驗室條件自行選擇）
• 降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存,。

Tips：

• 細胞經(jīng)過運輸后,，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞后死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象,。貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞,，900-1000rpm(約150g)離心3min,，棄上清。加5ml PBS重懸細胞,，再900-1000rpm(約150g)離心3min,，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,，如果平時碎片比較少,，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多,，建議PBS多洗幾次,。
• 細胞生長不均時，可以將細胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代,。
• 細胞生長緩慢時,，可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)（高不超過20%），也可以根據(jù)細胞生長狀態(tài),，選擇傳代細胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),。
• 不同細胞貼壁性差異比較大，所以消化時間差別較大,，20s-10min均有可能,，具體以細胞消化到相互分離但未脫落，并可以輕輕吹下為準,，嚴禁消化到細胞*漂浮,。客戶消化過度導致細胞死亡、漂浮,、生長緩慢,，不提供免費售后服務。
• 干冰發(fā)貨均為兩支,，客戶先復蘇一支,，若復蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態(tài)不佳,，我方不提供免費售后服務,。
• 細胞狀態(tài)正常時,，應盡快凍存細胞保種，凍存后應隨機抽取一支檢測凍存效果,。我方不對客戶凍存細胞導致死亡負責,，客戶凍存細胞死亡不提供免費售后服務。

Notice：

      客戶收到細胞有任何疑問請及時致電我們,，細胞收到后1周內(nèi)沒有任何電話,，或其他形式回訪，默認為細胞質量沒問題,，之后出了任何問題不給予免費售后,。細胞免費售后只提供一次，若重發(fā)后再次培養(yǎng)死亡不再免費補發(fā),，細胞收貨時已經(jīng)死亡或密度不足的除外,。

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