<培養(yǎng)細胞>

　　培養(yǎng)細胞總是會讓科研小白茶飯不思，擔(dān)驚受怕,，即使大好春光出去陪美眉或者小哥哥，也會牽腸掛肚,，心不在焉。

　　萬一污染了又要看到師兄師姐鄙視的目光,，嫌棄的嘴角,，還有因為污染造成其他戰(zhàn)友的驚恐不安，想想都怕怕,。

　　師姐A：師妹?。?！讓你養(yǎng)著玩的細胞又污染了,。

　　師姐B：納尼？,！

　　師姐C（火速趕往案發(fā)現(xiàn)場）：我的心肝寶貝細胞你還好么,？

　　師兄A:天啊?。,。〔⒅码娕保?ldquo;親愛的,，晚上不能陪你了,，新來的師妹細胞又污染了，我又要給培養(yǎng)箱滅菌了”,。

　　師妹：我是罪人,，好丟臉。像我這樣的小白如何避免細胞污染呢,？

　　“師妹過來,，師兄手把手教你，如何預(yù)防細胞污染。” 想當(dāng)年師兄就是靠養(yǎng)細胞培養(yǎng)起來的重度潔癖,。

　　常規(guī)操作不再贅述,，主要安利以下內(nèi)容：

　　1. 仔細閱讀所在實驗室的細胞室綜合管理制度，嚴(yán)格遵守制度,。

　　2. 細胞室室內(nèi)滅菌可以交叉進行,，熏蒸、臭氧,、紫外,、新潔爾滅。

　　3. 根據(jù)細胞室空間,，限制同時進入人數(shù),。

　　4. 超凈工作臺使用前后，紫外燈照射滅菌,。使用前,、后需用酒精棉球擦拭工作區(qū)消毒（小竅門：超凈臺使用完畢后，可以用酒精噴灑桌面,，再用抽紙擦干凈,，比用酒精棉球干凈多嘍！使用前不建議這種方法擦拭）,。物品放入超凈臺前均應(yīng)酒精噴灑消毒,，超凈臺內(nèi)嚴(yán)禁堆放過多物品，以免影響風(fēng)路平衡,。

　　5. 水浴鍋使用完畢后及時將水倒掉,，并保持鍋內(nèi)干燥。常用水浴鍋時,，每周將水浴鍋中的水至少煮沸一次,，以防細菌滋生。

　　6. 從培養(yǎng)箱取放細胞前,，用酒精清潔雙手（或手套）,，盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù)。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前,，用酒精消毒表面,，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入，以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣,。

　　7. 培養(yǎng)箱用水每周更換一次,，更換前托盤用酒精擦拭、紫外燈照射30分鐘殺菌,。

　　8. 滅完菌槍頭,，烘箱烘干后存放，保質(zhì)期1周。逾期需重新滅菌使用,。

　　9. 培養(yǎng)液,、胰酶、PBS等試劑盡量不和別人共用,，應(yīng)單獨分裝使用,，以免交叉污染，也便污染后自查原因,。

　　10.在使用0.22μm的微孔濾膜過濾自配溶液時,，注意無菌操作規(guī)范，以防濾液污染,。特殊情況可檢菌安全后使用,。

　　11.除特殊要求外，建議培養(yǎng)基中添加雙抗,，算是送給細胞的守護神,。

　　12.防護服、口罩,、手套缺一不可,。隔壁細胞室負責(zé)人是韓國回來的博士，讓學(xué)生只戴手套操作,，于是經(jīng)常聽他們說細胞掛了。

　　13.操作前,，準(zhǔn)備好所有實驗所需物品,，以減少走動；物品需有序擺放在超凈臺觸手可及的地方,，同時空留足夠操作空間,。

　　14.操作時，試劑不用盡量及時蓋上蓋子,，移至操作區(qū)外圍,，盡量不要從開口容器上經(jīng)過。

　　15.使用移液槍時,，將容器傾斜以便于移液,，切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一旦發(fā)生倒吸情況,，要及時用酒精棉球擦拭,，以免液體殘留導(dǎo)致細菌滋生。

　　16.先取試劑,、耗材,，再取移液槍、安槍頭。很多人習(xí)慣先安槍頭,，然后去拿試劑,、耗材，殊不知無意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導(dǎo)致污染,。

　　17.向廢液缸打廢液時,，需輕柔，以免造成水花四濺,，污染槍頭,、槍體。實驗結(jié)束,，及時倒掉廢液缸垃圾,，沖洗之后噴灑酒精，放入超凈臺紫外照射殺菌,。

　　18.培養(yǎng)基滴在桌面時要及時用酒精棉球擦拭,，切記不要等實驗做完再處理。因為那樣,，你的臺面上就會留下一個印記,，對于強迫癥的人來說，不,！能,！接！受?。,。?！

　　19.凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊,。復(fù)蘇細胞時，從液氮罐取出凍存管,，輕擰蓋子,，以確認蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處,，在37度水浴鍋中快速解凍,，水面不可超過凍存管蓋沿；不建議直接扔進水中,，以免水滲入造成污染,。

　　20.一旦污染，及時處理,，不到不得已不建議施救,；查找原因,，防止再犯。

　　總的來說,，防患未然比亡羊補牢強得多,。操作過程中對于模糊不清的，寧愿認為是有菌的棄掉,，也不要心存僥幸,！