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誘導動物細胞融合的方法

來源:自然基因科技有限公司   2008年10月17日 16:31  

誘導動物細胞融合的方法

在體外培養(yǎng)條件下,,動物細胞會自發(fā)融合,,但是頻率極低。因此,,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,,或者采用電融合技術,人為地促進細胞融合,。

病毒誘導融合  病毒是zui早采用的融合劑,。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒,、皰疹病毒等,,其中仙臺病毒zui常用,。用作融合劑的病毒必須事先用紫外線或β-丙內酯滅活,使病毒的感染活性喪失而保留病毒的融合活性,。

用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合的

優(yōu)點:融合率較高,,對各種動物細胞都適宜,,且仙臺病毒能在雞胚中大量繁殖,,容易培養(yǎng),;

缺點:仙臺病毒不穩(wěn)定,,在保存過程中融合活性會降低,,并且制備過程比較煩瑣。此外,,病毒引進細胞后,,可能會對細胞的生命活動產生干擾,。

聚乙二醇PEG誘導融合  聚乙二醇PEG具有強烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白質的作用,,能夠有效地促進植物原生質體和動物細胞的融合。在不同種類的動物細胞混合液中加入聚乙二醇,,就會發(fā)生細胞凝集作用,;在稀釋和除去聚乙二醇的過程中,就會發(fā)生細胞融合,。聚乙二醇誘導細胞融合的機理,目前還不太清楚,。聚乙二醇是化學試劑,,使用起來很方便,,誘導細胞融合的頻率比較高,但是它有一定毒性,,對有些細胞(如卵細胞)不適用,。

電融合  20世紀80年代建立起來的電融合技術,,是將兩種細胞的混合液置于低壓交流電場中,,使細胞聚集成串珠狀,,然后施加高壓電脈沖,,以促使細胞融合。緊密排列的細胞,,在相互接觸的細胞膜之間會出現(xiàn)無蛋白顆粒的脂質區(qū),當受到電擊時,,這個區(qū)域就會被擊穿,,產生脂雙層膜孔,導致細胞之間的細胞質連通,進而發(fā)生細胞融合,。電融合技術有許多優(yōu)點,,如導細胞融合的頻率高,對細胞無毒害作用,,操作簡便,,可重復性好。

 

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