抗原修復(fù)鍋Antigen Retriever

    
免疫組織化學(xué)方法成功與否關(guān)鍵在于抗原決定簇的保存和暴露.組織經(jīng)甲醛固定.甲醛的醛基與

抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構(gòu)像改變.從而影響檢測(cè)蛋白表達(dá).要充分暴露抗原決定簇，通

常用到抗原修復(fù)鍋,。強(qiáng)適于甲醛固定的組織，經(jīng)石蠟包

埋后進(jìn)行免疫染色前的處理,，配合特別的抗原修復(fù)緩沖液確保你得到搞質(zhì)量的免疫染色效

果,。

· 一次可以在6中不同緩沖液中運(yùn)行，進(jìn)行抗原暴露

· 僅暴露抗原決定簇,，不損傷組織的形態(tài)

· 實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定,，結(jié)果重現(xiàn)性高

· 系列的玻片在獨(dú)立環(huán)境中經(jīng)過(guò)處理

抗原修復(fù)鍋怎樣工作？

    看上去,，抗原修復(fù)鍋似我們烹飪的高壓鍋,。這是一款功能*的“高壓鍋”，主要用于抗原暴露

的工作,，主要的工作原理也是裝玻片的幾個(gè)分室可以達(dá)到高溫(>120°C)高壓,。靈敏的傳感控制

器來(lái)保持一定的溫度和壓力及一定的時(shí)間，這些工作參數(shù)都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的科學(xué)實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)

據(jù),。當(dāng)達(dá)到需要的溫度,，抗原修復(fù)鍋會(huì)在該溫度下保持幾分鐘，之后鍋內(nèi)玻片被冷卻2個(gè)多小

時(shí),，特殊設(shè)材質(zhì)的內(nèi)鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度,。 

誰(shuí)是受益人？

    研究病理的實(shí)驗(yàn)室,，那里需要高質(zhì)量染色照片（用來(lái)發(fā)表）的

    缺乏技術(shù)人員的實(shí)驗(yàn)室,，學(xué)生和博士后均可以處理玻片進(jìn)行組織染色，且不需要很多時(shí)間來(lái)摸索

    小型病理實(shí)驗(yàn)室,，每天處理的玻片數(shù)量有限

怎樣選擇一種緩沖液（Buffer）

    如果你已經(jīng)知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復(fù),，那么用抗原修復(fù)鍋時(shí),，這種緩沖

液也同時(shí)適用的機(jī)會(huì)很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U,，同時(shí)也提供同種更加

溫和的組織處理緩沖液,，我們稱之G系列，R-Buffer AG/BG/CG/UG,。

    
選擇Buffer,，主要考慮以下兩點(diǎn)：

1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體

抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開(kāi)始的時(shí)候選擇抗原表達(dá)環(huán)境的

適Buffer,。以下是經(jīng)驗(yàn)供大家參考：

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r

elated) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

2.  固定液以及固定程度

建議的組織切片的抗原修復(fù)處理是一種針對(duì)普通的適化狀態(tài)切片,。如果用來(lái)切片的組織塊沒(méi)有

充分固定，或者過(guò)固定（留在福爾馬林溶液中時(shí)間過(guò)長(zhǎng)）,，或者用了其它的固定液,，那么，處

理組織切片的流程方案需要重新修訂,，便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液,。對(duì)于過(guò)固定的

材料一般推薦用U buffer，或者在同一Buffer里面增加循環(huán)

抗原修復(fù)鍋技術(shù)參數(shù)：

使用抗原修復(fù)鍋進(jìn)行染色的效果示例

1.福爾馬林固定,，石蠟包埋,，人乙狀結(jié)腸組織切片，經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露,，R-

Buffer C (pH 6.0),，組織玻片降溫過(guò)夜，抗體MIB-1,，抗原Ki-67,，R-Detect HRP系統(tǒng)染色

2. .福爾馬林固定，石蠟包埋,，人乙狀結(jié)腸組織切片,，經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露，R-

Buffer A (pH 8.1),，組織玻片降溫過(guò)夜,，抗體#4B11，抗原CD8 (cell membrane),，R-

Detect HRP系統(tǒng)染色.

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