分光光度法是指應(yīng)用分光光度計(jì)的分析方法,，具有靈敏,、準(zhǔn)確、快速及選擇性好等特點(diǎn),。

　　通常所測(cè)樣品溶液濃度下限可達(dá)10-6~10-5mol/L,，適用于測(cè)定食品中的微量組分（如肉制品中的亞硫酸鹽、糖果中的二氧化硫等）,。

　　一,、原理

　　1.1 物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收
當(dāng)光束照射到物質(zhì)上時(shí)，光與物質(zhì)發(fā)生相互作用,，產(chǎn)生反射,、散射、吸收或透射。
若被照射的是均勻溶液,，光的散射可以忽略,。

　　
1.1.1 溶液顏色的產(chǎn)生
當(dāng)一束白光通過某一有色溶液時(shí)，一些波長(zhǎng)的光被溶液吸收,，另一些波長(zhǎng)的光則透過溶液,。透射光或反射光刺激人眼使人感到顏色的存在。人把自身能感覺到的光定義為可見光,。

　　
在可見光區(qū),，不同波長(zhǎng)的光呈現(xiàn)不同的顏色，因此溶液的顏色由透射光的波長(zhǎng)所決定,。
透射光與吸收光可組成白光,，故稱這兩種光互為補(bǔ)色光，兩種顏色互為補(bǔ)色,。

　　1.1.2 光吸收的本質(zhì)
當(dāng)一束光照射到某物質(zhì)或其溶液時(shí),，組成該物質(zhì)的分子、原子或離子與光子發(fā)生“碰撞”,，光子的能量就轉(zhuǎn)移到分子,、原子或離子上，是這些粒子由低能態(tài)（基態(tài)）躍遷到較高能太（激發(fā)態(tài)）,，這個(gè)作用稱為物質(zhì)對(duì)光的吸收,。

　　
被激發(fā)的粒子約在10-8s后回到基態(tài)，并以熱或熒光等形式釋放出能量,。分子、原子或離子具有不連續(xù)的量子化能級(jí),，僅當(dāng)照射光光子的能量hυ,，與被照射物質(zhì)粒子的基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量之差相當(dāng)時(shí)，才能發(fā)生吸收,。

　　
不同物質(zhì)微粒由于結(jié)構(gòu)不同而具有不同的量子化能級(jí),，其基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量差也不相同。
所以物質(zhì)對(duì)光的吸收具有選擇性,。

　　1.1.3 吸收曲線
吸收曲線,，也稱為吸收光譜，描述了物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收能力,。將不同波長(zhǎng)的光透過某一固定濃度和厚度的有色溶液,，測(cè)量每一波長(zhǎng)下有色溶液對(duì)光的吸收程度（即吸光度），然后以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo),，以吸光度為縱坐標(biāo)作圖,，繪制的曲線即為吸收曲線。

　　
不同濃度的同一物質(zhì)，在吸收峰附近的吸光度隨著濃度增加而增大,，但大吸收波長(zhǎng)不變,。若在大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，則靈敏度高,。

　　
因此,，吸收曲線是分光光度法中選擇測(cè)定波長(zhǎng)的重要依據(jù)。

　　
1.2 光吸收基本定律
即朗伯-比爾定律：
當(dāng)一束平行單色光通過液層厚度為b的有色溶液時(shí),，溶質(zhì)吸收了光能,，光的強(qiáng)度就要減弱。
溶液的濃度越大,，通過的液層厚度越大,，入射光越強(qiáng)，則光被吸收的越多,，光強(qiáng)度的減弱也越顯著,。

　　
該定律是紫外可見分光光度法等各類吸光光度法定量分析的依據(jù)，是由實(shí)驗(yàn)觀察得到的,，不僅適用于溶液,，也適用于其他均勻非散射的吸光物質(zhì)。
A=lg(I/I0)=εbc
A-吸光度,；
I0-入射光強(qiáng)度,，cd；
I-透射光強(qiáng)度,，cd,；
ε-吸光系數(shù)，L/(mol˙cm),；
b-液層厚度（光程長(zhǎng)度）,，cm；
c-有色溶液的濃度,，mol/L,。

　　
其物理意義為：當(dāng)一束平行單色光通過單一均勻、非散射的吸光物質(zhì)溶液時(shí),，溶液的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比,。

　　
式中ε是吸光物質(zhì)在特定波長(zhǎng)和溶劑的情況下的一個(gè)特征常數(shù)，數(shù)值上等于濃度為1mol/L的吸光物質(zhì)在1cm光程中的吸光度,。
ε是吸光物質(zhì)吸光能力的量度,，ε值越大，方法的靈敏度越高,。
由實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算ε時(shí),，常以被測(cè)物質(zhì)的總濃度代替吸光物質(zhì)的濃度,，實(shí)際上時(shí)表觀摩爾吸光系數(shù)。

　　
在多組分體系中,，如果各種吸光物質(zhì)之間沒有相互作用,，體系的總吸光度等于各組分吸光度之和，即吸光度具有加和性,。
透光度T是透射光強(qiáng)度I與入射光強(qiáng)度I0之比,，即：
T=I/I0
因此：A=lg(1/T)

　　二、 主要部件

　　盡管光度計(jì)種類型號(hào)繁多,，但它們都是由相同的基本部件組成的,，包括光源、單色器,、吸收池和檢測(cè)系統(tǒng),。

　　2.1 光源
在測(cè)量吸光度時(shí)，要求光源發(fā)出所需波長(zhǎng)范圍內(nèi)的連續(xù)光譜,，要具有足夠的光強(qiáng)度,，并在一定時(shí)間內(nèi)能保持穩(wěn)定。在可見光區(qū)測(cè)量時(shí),，通常使用鎢絲燈作為光源,。鎢絲加熱到白熾狀態(tài)時(shí)會(huì)發(fā)出波長(zhǎng)在320~2500nm之間的連續(xù)光譜。

　　
鎢絲燈工作溫度一般為2600~2870K,，熔點(diǎn)為3680K,。鎢絲燈的溫度決定于電源電壓，電源電壓的微小波動(dòng)會(huì)引起鎢燈光強(qiáng)度的很大變化,，因此必須使用穩(wěn)壓電源,。

　　
在紫外區(qū)測(cè)量時(shí)，常采用氫燈或氘燈產(chǎn)生波長(zhǎng)在180~375nm之間的連續(xù)光譜作為光源,。
其理想光源應(yīng)具有覆蓋整個(gè)紫外可見光區(qū)的連續(xù)輻射,，強(qiáng)度應(yīng)比較高，且隨波長(zhǎng)變化能量變化不大,，但在實(shí)際上難以實(shí)現(xiàn)。

　　
氘燈輻射強(qiáng)度比氫燈高2~3倍,，壽命也比較長(zhǎng),。氙燈的強(qiáng)度一般高于氫燈，但欠穩(wěn)定,，波長(zhǎng)范圍180~1000nm,，常用作熒光分光光度計(jì)的激發(fā)光源。
 

　　2.2 單色器
單色器是將光源發(fā)射的復(fù)合光分解為單色光的裝置,。
一般由5部分組成：入光狹縫,、準(zhǔn)光（一般由透鏡或凹面反光鏡使入射光成為平行光束）,、色散器、投影器（一般由一個(gè)透鏡或凹面鏡將分光后的單色光投影至出光狹縫）,、出光狹縫,。

　　
色散器是單色器的核心部分，常用的色散元件是棱鏡或光柵,。
棱鏡由玻璃或石英制成,，玻璃棱鏡色散能力強(qiáng)，但吸收紫外光,，只能用于350-820nm波長(zhǎng)的分析測(cè)定,，在紫外區(qū)必須用石英棱鏡。

　　
光柵的特點(diǎn)是：色散均勻,，呈線性,，光度測(cè)量便于自動(dòng)化，工作波段廣,。

　　
2.3 吸收池
也稱為比色皿,，是盛放樣品溶液的容器，具有兩個(gè)互相平行,、透光且具有厚度的平面,。玻璃吸收池光程長(zhǎng)度一般為1cm，也有0.1-10cm的,。

　　
由于吸收池厚度存在一定誤差,，其材質(zhì)對(duì)光不是*透明，在做定量分析時(shí),，對(duì)吸收池應(yīng)做配套性試驗(yàn),，試驗(yàn)后標(biāo)記出放置方向。紫外光區(qū)數(shù)值不跳為石英,。

　　
2.4檢測(cè)系統(tǒng)

　　檢測(cè)系統(tǒng)包括檢測(cè)器和記錄顯示裝置,。檢測(cè)器是一種光電轉(zhuǎn)換設(shè)備，將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)顯示出來,。常用的檢測(cè)器有光電池,、光電倍增管和光二極管陣列檢測(cè)器等。

　　
光電池的光電流較大,，不用放大,，用于初級(jí)的分光光度計(jì)上，疲勞效應(yīng)嚴(yán)重,。
光電倍增管利用二次電子發(fā)射來放大光電流,，放大倍數(shù)可高達(dá)108倍，應(yīng)用為廣泛,。
光二極管陣列檢測(cè)器由于全部波長(zhǎng)同時(shí)被檢測(cè),，掃描速度快,，可在0.1s內(nèi)完成對(duì)190-800nm波長(zhǎng)范圍的掃描。

　　
記錄顯示裝置包括放大器和結(jié)果顯示裝置,。70年代采用數(shù)字讀出裝置?，F(xiàn)代在主機(jī)中裝備有微處理機(jī)或外接微型計(jì)算機(jī)，控制儀器操作和處理測(cè)量數(shù)據(jù),，裝有屏幕顯示,、打印機(jī)和繪圖儀等。

　　三,、測(cè)量條件的選擇

　　
3.1 顯色反應(yīng)及顯色條件的選擇
進(jìn)行比色分析或光度分析時(shí),，首先要把待測(cè)組分轉(zhuǎn)變成有色化合物，然后進(jìn)行比色或光度測(cè)定,。將待測(cè)組分轉(zhuǎn)變成有色化合物的反應(yīng)叫顯色反應(yīng),，與待測(cè)組分形成有色化合物的試劑稱為顯色劑。

　　3.1.1 顯色反應(yīng)的選擇
顯色反應(yīng)分兩類,，即絡(luò)合反應(yīng)和氧化還原反應(yīng),，絡(luò)合反應(yīng)是主要的顯色反應(yīng)。
選用的原則是：
1）選擇靈敏的顯色反應(yīng),。摩爾吸光系數(shù)ε的大小是顯色反應(yīng)靈敏度高低的重要標(biāo)志,，因此應(yīng)當(dāng)選擇生成的有色物質(zhì)的ε較大的顯色反應(yīng)。一般來說,，當(dāng)ε為104-105時(shí),，可認(rèn)為該反應(yīng)靈敏度較高。
2）盡可能選擇選擇性好的顯色劑,。即顯色劑僅與一個(gè)組分或少數(shù)幾個(gè)組分發(fā)生顯色反應(yīng),。
3）顯色劑在測(cè)定波長(zhǎng)處無明顯吸收。通常把兩種有色物質(zhì)大吸收波長(zhǎng)之差稱為對(duì)比度,，一般要求顯色劑與有色化合物的對(duì)比度在60nm以上,。
4）反應(yīng)生成的有色化合物組成恒定，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,。

　　
3.1.2 顯色條件的選擇
吸光光度法測(cè)定的是顯色反應(yīng)達(dá)到平衡后溶液的吸光度,，因此要得到準(zhǔn)確的結(jié)果，必須從研究平衡著手,，了解影響顯色反應(yīng)的因素,，控制適當(dāng)?shù)臈l件，使顯色反應(yīng)*和穩(wěn)定,。

　　
1）根據(jù)溶液平衡原理，有色絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù)越大,，顯色劑過量越多,，越有利于待測(cè)組分形成有色絡(luò)合物,。但是過量顯色劑的加入有時(shí)會(huì)引起副反應(yīng)，對(duì)測(cè)定反而不利,。
2）酸度對(duì)顯色反應(yīng)的影響是多方面的,。一種金屬離子與某種顯色劑反應(yīng)的適宜酸度范圍是通過實(shí)驗(yàn)來確定的。確定的方法是固定待測(cè)組分及顯色劑的濃度,，改變?nèi)芤簆H值,，測(cè)定其吸光度，作出吸光度-pH值關(guān)系曲線,，選擇曲線平坦部分對(duì)應(yīng)的pH值作為測(cè)定條件,。
3）顯色反應(yīng)一般在室溫下進(jìn)行，有的反應(yīng)需要加熱,，以加速顯色反應(yīng),，使之進(jìn)行*。
4）大多數(shù)顯色反應(yīng)需要經(jīng)過一定的時(shí)間才能完成,，其長(zhǎng)短與溫度的高低有關(guān),，也會(huì)受到空氣的氧化或發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)使眼色顏色減弱。因此必須通過實(shí)驗(yàn)作出在一定溫度下的吸光度-時(shí)間關(guān)系曲線,，得到適宜的顯色時(shí)間,。

　　
3.1.3 干擾的消除
1）干擾的類型
光度分析中，共存離子如本身有顏色,，或與顯色劑作用生成有色化合物,，都將干擾測(cè)定。
A.干擾離子本身有顏色
B.干擾離子本身無顏色,，但能與顯色劑反應(yīng)生成穩(wěn)定的配合物,。若生成的配合物有色則直接干擾測(cè)定，若生成的配合物無色,，也降低了顯色劑的濃度,，影響被測(cè)離子與顯色劑的反應(yīng)，而產(chǎn)生誤差,。
C.干擾離子與被測(cè)離子反應(yīng)生成配合物或沉淀,，影響被測(cè)離子的測(cè)定。

　　
2）消除干擾的方法
A.控制溶液酸度,。
B.加入掩蔽劑與干擾離子形成更穩(wěn)定的化合物,，使干擾離子不再產(chǎn)生干擾。
C.里用參比溶液消除某些有色干擾離子的影響,。
D.選擇適當(dāng)?shù)墓ぷ鞑ㄩL(zhǎng)以消除干擾,。
E.采用適當(dāng)?shù)姆蛛x方法。

　　
3.2 吸光度測(cè)量條件的選擇

　　3.2.1 入射光波長(zhǎng)的選擇
應(yīng)根據(jù)吸收光譜曲線,，選擇溶液具有大吸收時(shí)的波長(zhǎng)作為入射光的波長(zhǎng),。
如顯色劑與鈷絡(luò)合物在420nm波長(zhǎng)處均有大吸收峰,。如用此波長(zhǎng)測(cè)定鈷，則未反應(yīng)的顯色劑會(huì)造成干擾而降低測(cè)定的準(zhǔn)確度,。因此必須選擇在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定,，在此波長(zhǎng)下顯色劑不發(fā)生吸收。而鈷絡(luò)合物則有一吸收平臺(tái),。

　　
3.2.2 參比溶液的選擇
1）如果僅待測(cè)物與顯色劑的反應(yīng)產(chǎn)物有吸收,，可用純?nèi)軇?/strong>作參比溶液。
2）如果顯色劑或其他試劑略有吸收,，應(yīng)用空白溶液（不加試樣的溶液）作參比溶液,。
3）如試樣中其他組分有吸收，但不與顯色劑反應(yīng),，則當(dāng)顯色劑無吸收時(shí),，可用試樣溶液作參比溶液，當(dāng)顯色劑略有吸收時(shí),，可在試液中加入適當(dāng)掩蔽劑將待測(cè)組分掩蔽后再加顯色劑,，以此溶液作參比溶液。

　　
3.2.3 吸光度讀數(shù)范圍的選擇
實(shí)踐證明,，吸光度在0.2-0.5內(nèi)時(shí),，測(cè)量的相對(duì)誤差小。
可用兩種方法來調(diào)整被測(cè)溶液的吸光度：
1）控制被測(cè)溶液的濃度,。如改變?nèi)恿?，改變?nèi)芤旱臐饪s倍數(shù)或稀釋倍數(shù)。
2）選擇不同的比色皿,。吸光度小的溶液要用光程長(zhǎng)的比色皿,，吸光度大的溶液要用光程短的比色皿。

　　四,、應(yīng)用

　　4.1 應(yīng)用領(lǐng)域

　　4.1.1高含量組分測(cè)定-示差法
當(dāng)待測(cè)組分含量較高時(shí),，測(cè)得的吸光度值常常偏離朗伯-比爾定律。即使不發(fā)生偏離,，也因?yàn)橥ǔ２捎眉內(nèi)軇┳鲄⒈热芤海ㄆ胀ü舛确ǎ?，使測(cè)得的吸光度太高，超出適宜的讀數(shù)范圍而引入較大的誤差,。采用示差法就能克服這一缺點(diǎn),。

　　
但應(yīng)用示差法時(shí)，要求儀器光源有足夠的發(fā)射強(qiáng)度或能增大光電流放大倍數(shù),，以便能調(diào)節(jié)參比溶液透光度為100%,。這就要求儀器單色器質(zhì)量高，電光學(xué)系統(tǒng)穩(wěn)定性好。

　　
4.1.2 多組分分析
應(yīng)用紫外可見分光光度法,，常?？赡茉谕辉嚇尤芤褐胁贿M(jìn)行分離而測(cè)定一個(gè)以上組分。
假定溶液中同時(shí)存在兩種組分x和y,，其吸收光譜一般有重疊和不重疊兩種情況。
1）不重疊的測(cè)定組分相互不產(chǎn)生干擾,。
2）若吸收光譜重疊,，在波長(zhǎng)為λ1和λ2時(shí)分別測(cè)定吸光度A1和A2，由吸光度值的加和性得到聯(lián)立方程,，通過解聯(lián)立方程求得各濃度值,。

　　4.2 定量方法
紫外可見分光光度分析的定量依據(jù)是光吸收定律，但具體操作方法卻有多種

　　4.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線法
即工作曲線法,，適用于大量重復(fù)的樣品分析,，是工廠控制分析中應(yīng)用多的方法。
根據(jù)光吸收定律,，對(duì)于一種有色化合物,，ε是一個(gè)定值，若把光程L也固定,，那么吸光度A就和溶液的濃度c成正比,，也就是說吸光度A和濃度c呈線性關(guān)系。
配制一系列適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,，顯色后分別測(cè)定其吸光度,，把吸光度A對(duì)濃度c作圖，即得工作曲線,。

　　
4.2.2 直接比較法

　　直接比較法其實(shí)質(zhì)也是工作曲線法,，是一種簡(jiǎn)化的工作曲線法。
配一個(gè)已知被測(cè)組分濃度為cs的標(biāo)樣,，測(cè)其吸光度為As,，在同樣條件下再測(cè)未知樣品的吸光度為Ax，通過計(jì)算可求出未知樣品的濃度cx,。
As=εcsL
Ax=εcxL
由于溶液性質(zhì)相同,，比色皿厚度一樣，所以As/Ax=cs/cx
式中：
cs-已知被測(cè)組分的濃度,，mol/L,；
cx-未知樣品的濃度，mol/L,；
As-已知被測(cè)組分的吸光度,；
Ax-未知樣品的吸光度。
直接比較法簡(jiǎn)化了繪制工作曲線的步驟，適用于個(gè)別樣品的測(cè)定,。
操作時(shí)應(yīng)注意配制標(biāo)樣的濃度要接近被測(cè)樣品的濃度,，這樣能減少測(cè)量誤差。

　　
4.2.3 標(biāo)準(zhǔn)加入法
標(biāo)準(zhǔn)加入法是工作曲線的一種特殊應(yīng)用,。
選擇適當(dāng)?shù)娘@色條件,，先測(cè)定濃度為cx的未知樣品吸光度為Ax，再向未知樣品中加入一定量的標(biāo)樣,，配置成濃度為cx+Δc1,、cx+Δc2……一系列樣品，分別顯色后再測(cè)定吸光度為A1,、A2……后在坐標(biāo)紙上繪圖,，以吸光度A為縱坐標(biāo)，以濃度c為橫坐標(biāo),，分別畫出Δc1,、Δc2所對(duì)應(yīng)的A1、A2等各點(diǎn),，連成直線后延長(zhǎng),，與橫軸的交點(diǎn)cx也就是未知樣品的濃度cs。

　　
應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)加入法時(shí)要注意,，加入的標(biāo)樣濃度要適當(dāng),，使畫出的曲線保持適當(dāng)角度，濃度過大或過小都會(huì)帶來測(cè)量誤差,。

　　
這種方法操作比較麻煩,，不適于作系列樣品分析，但它適用于組成比較復(fù)雜,，干擾因素較多而又不太清楚的樣品,，因?yàn)樗?strong>消除背景的影響。

　　
4.3 紫外可見分光光度計(jì)使用中的注意點(diǎn)
4.3.1 保護(hù)光源
光源燈有一定的壽命,，儀器不工作時(shí)不要開燈,，若工作間歇時(shí)間短，可不關(guān)燈,。
一旦停機(jī),，則要待燈冷卻后再重新啟動(dòng)，并預(yù)熱15min,。
燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定時(shí),，就及時(shí)更換。
經(jīng)經(jīng)紫外光照射后形成結(jié)痕可用無水乙醇去除,。

　　
4.3.2 保證合適的工作環(huán)境
溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素,。
不適宜的溫度和濕度可引起機(jī)械部件的銹蝕,，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降,；

　　
造成光柵,、反射鏡、聚焦鏡等光學(xué)部件的鋁膜銹蝕,，產(chǎn)生光能不足,、雜散光、噪聲等,；
甚至使儀器停止工作,，從而影響儀器壽命。維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正溫度和濕度,。

　　
實(shí)驗(yàn)室，特別是地處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室,，應(yīng)具備四季恒溫的儀器室,，配備恒溫設(shè)備。
環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體也可以影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性,、降低各種限位開關(guān),、按鍵、光電耦合器的可靠性,，也是造成光學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一,。

　　
因此必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器內(nèi)衛(wèi)生條件,，防塵,。

　　
4.3.3 定期除塵、調(diào)校
儀器使用一定時(shí)間后,，內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃,，由維修工程師或在工程師指導(dǎo)下定期開啟儀器外罩對(duì)內(nèi)部進(jìn)行除塵工作，同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,，對(duì)光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔,，必要時(shí)對(duì)光路進(jìn)行校準(zhǔn)，對(duì)機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤(rùn)滑,，后恢復(fù)原狀,，再進(jìn)行一些必要的檢測(cè)、調(diào)校和記錄,。

　　
4.3.4 正確使用比色皿
拿比色皿時(shí),，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面,，以免沾污,。
清洗比色皿時(shí)，先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈,。若被比色皿被有機(jī)物沾污,，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液（1:2）浸泡片刻，再用水沖洗,。每次做完實(shí)驗(yàn)應(yīng)立即洗凈比色皿,。
比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干，以保護(hù)透光面,。

　　
測(cè)定有色溶液吸光度時(shí),，一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度,。在測(cè)定一系列溶液的吸光度時(shí),，通常都按由稀到濃的順序測(cè)定，以減少測(cè)量誤差,。
若分光光度計(jì)噪音比較大,，有可能是光源燈泡使用時(shí)間超過壽命期，可更換光源燈泡,。
若自檢時(shí)提示波長(zhǎng)自檢出錯(cuò),，有可能是自檢過程中打開過儀器樣品室的蓋子，可關(guān)上儀器樣品室蓋子,，重新自檢,。